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PCR試劑盒試驗反應引物設計要點2023/12/25
引物設計有3條基本原則:首先引物與模板的序列要緊密互補,其次引物與引物之間避免形成穩定的二聚體或發夾結構,再次引物不能在模板的非目的位點引發DNA聚合反應(即錯配)。引物設計應注意如下要點:1、引物的...
河弧菌(VF)檢測試劑盒(熒光-PCR法)使用方法2023/12/18
河弧菌(VF)檢測試劑盒(熒光-PCR法)使用方法:一、稀釋標準曲線樣品(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能...
各種抗體的保存方法匯集2023/12/11
1、抗體濃度抗體濃度過低(2、多克隆抗體多克隆抗體在血清中于-20℃保存十年其活性損失不大。然而,一旦抗體被純化后,儲存在50%的甘油中于-20℃保存,即使沒有凍融,其活性的損失也可以觀察到,盡管其進...
小鼠S100鈣結合蛋白A7ELISA試劑盒常用標本收集2023/12/4
ELISA是一種廣泛應用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術。常規用于ELISA實驗的樣本包含血清、血漿、組織勻漿等。不同樣本類型的預處理方法存在差異,合適的樣本預處理是確保ELISA實...
抗體檢測方法陳述2023/11/28
抗體,也叫免疫球蛋白(Ig),是一種能特異性結合抗原的糖蛋白,而抗原是在易感染動物體內引發抗體產生的物質。抗體檢測的三種方法:1、直接免疫熒光法(IIF)這種的實驗辦法可以對人體內含有的抗體和試劑里面...
?PCR反應循環參數分析2023/11/20
循環參數:1.預變性模板DNA全變性與PCR酶的全激活對PCR能否成功至關重要,建議加熱時間參考試劑說明書,一般未修飾的Taq酶激活時間為兩分鐘。2.變性步驟循環中一般95℃,30秒足以使各種靶DNA...
移液和洗滌技術對CV值高的影響2023/11/13
免疫檢測法的精確性表現為單次實驗孔間(批內)的重復性和多次實驗之間(批間)的重復性。CV值高則表明精確度低,通常由以下兩個原因造成:移液技術和洗滌技術。一、移液技術1.移液時,槍頭應對準孔,避免接觸孔...
檢測抗體三種方法介紹2023/11/6
抗體是哺乳動物適應性免疫系統對抗病原體的核心,它是在病原體刺激下由漿細胞(效應B細胞)所分泌的一種免疫球蛋白,能夠識別并結合特異的病原體抗原,隨后通過介導中和作用、調理作用、效應T細胞殺傷等來清除病原...
原代細胞的兩種傳代培養方法2023/10/30
原代細胞是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養的細胞,稱為原代細胞。一股認為,培養的原代的第1代細胞和傳代到第10代以內的細...
PCR反應假陰性及假陽性問題可能原因及解決方法2023/10/23
一、假陰性(無擴增產物)現象:正對照有條帶,樣品無條帶可能原因:·模板:含有Taq酶抑制劑、雜蛋白,模板上樣量低或模板降解·引物:引物降解,引物設計不合理·試劑:酶失活,buffer不合適·反應條件:...
糖原合成酶(GCS)試劑盒微量法測定步驟2023/10/17
糖原合成酶(Glycogensynthase,GCS)試劑盒測定原理:GCS催化UDPG和葡萄糖殘基生成糖原和UDP,丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進一步依次催化NADH氧化生成NAD+,在340nm下測定N...
培養基的滅菌方法2023/10/8
所謂滅菌就是殺死一切微生物,包括微生物的營養體和芽孢,這一概念不同于消毒。滅菌的方法很多,在實驗室可以使用干熱滅菌、對于環境可以使用化學試劑滅菌,但化學試劑的滅菌方法有很大的限制。在工業生產中,對于培...
小鼠elisa檢測試劑盒標本收集處理2023/10/3
elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。elisa檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血...
ELISA試驗常見問題與解決方法歸總2023/9/25
ELISA即酶聯免疫吸附測定,是一類常用的免疫酶技術。主要方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,然后利用酶標記(偶聯)的抗體或抗原與之孵育,加入顯色劑顯色,通過酶標儀測定待測物顏色與標準物顏色的...
PCR的血液標本保存之單個核細胞分離出來方法2023/9/18
PCR的血液標本保存最好是用淋巴細胞分離液把單個核細胞分離出來,然后-80℃保存。外周血單個核細胞(Peripheralbloodmononuclearcell,PBMC)的分離是免疫學研究中的一項基...

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