豬*實驗原理:*是以無活性的酶原形式存在于動物胰臟中,在Ca2 的存在下,被腸激酶或有活性的*自身激活,從肽鏈N端賴氨酸和異*殘基之間的肽鍵斷開,失去一段六肽,分子構象發生一定改變后轉變為有活性的*。
*原的分子量約為24000,其等電點約為pH8.9,*的分子量與其酶原接近(23300),其等電點約為pH10.8,zui適pH7.6~8.0,在pH=3時zui穩定,低于此pH時,*易變性,在pH>5時易自溶。Ca2 離子對*有穩定作用。
重金屬離子,有機磷化合物和反應物都能抑制*的活性,胰臟、卵清和豆類植物的種子中都存在著蛋白酶抑制劑。zui近發現在一些植物的塊基(如土豆、白薯、芋頭等)中也存在有*抑制劑。
*能催化蛋白質的水解,對于由堿性氨基酸(*、賴氨酸)的羧基與其他氨基酸的氨基所形成的鍵具有高度的專一性。此外還能催化由堿性氨基酸和羧基形成的酰胺鍵或酯鍵,其高度專一性仍表現為對堿性氨基酸一端的選擇。*對這些鍵的敏感性次序為:酯鍵> 酰胺鍵> 肽鍵。因此可利用含有這些鍵的酰胺或酯類化合物作為底物來測定*的活力。目前常用苯甲酰-L-*-對硝基苯胺(簡稱BAPA)和苯甲酰-L-*-β-萘酰胺(簡稱BANA)測定酰胺酶活力。用苯甲酰-L-*乙酯(簡稱BAEE)和對甲苯磺酰-L-*甲酯(簡稱TAME)測定酯酶活力。本實驗以BAEE為底物,用紫外吸收法測定*活力。酶活力單位的規定常因底物及測定方法而異。
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