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堿性蛋白酶測試盒NP酶活性計算

2021-12-1  閱讀(1790)

堿性蛋白酶測試盒NP酶活性計算:

(1)按蛋白濃度計算 NP活性單位(U)定義:30℃每毫克蛋白每分鐘水解產生1μmol為一個酶活單位。NP活性(U/mgprot)=C標準品×△A測定÷△A標準×V1÷(Cpr×V2)÷T =0.125×△A測定÷△A標準÷Cpr 

(2)按樣本鮮重計算 NP活性單位(U)定義:30℃每克樣品每分鐘催化水解產生1μmol為一個酶活單位。NP活性(U/g鮮重)=C標準品×△A測定÷△A標準×V1÷(W×V2÷V3)÷T =0.125×△A測定÷△A標準÷WC標準品:標準溶液濃度,0.25μmol/mL;Cpr:粗酶液蛋白質濃度,mg/mL;W:樣品鮮重,g; V1:酶促反應總體積,0.1mL;V2:加入反應體系中粗酶液體積,20µL=2×10-2mL;V3:粗酶液總體積,1mL; T:催化反應時間,10min。 注意:若反應較弱,(A測定管-A對照管)差值較小,可適當延長反應時間(20-30min),即步水浴時間,最后計算酶活時對公式進行修改。

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