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田鼠分枝桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒注意事項

2021-2-2  閱讀(173)

田鼠分枝桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒注意事項:

1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。設立一個的PCR實驗室。

2.純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。

3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。

4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。

5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。

6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。

7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。

田鼠分枝桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化。而在平臺期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR 的終產物量與起始模板量之間沒有線性關系,根據終的 PCR 產物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數。

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