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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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豚鼠elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中可能影響成果的原因
2018-3-6 閱讀(304)
下面分析豚鼠elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中可能影響成果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法
1. 孵育
可能原因： ①孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*; ②孵育時(shí)刻人為延伸，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反響孔周圍，難以清洗*。
解決辦法：①貼封片或加蓋; ②按說(shuō)明過(guò)程嚴(yán)厲控制操作時(shí)刻。
2. 洗板
可能原因：①選用手藝洗板,孔與孔之間液體穿插。②選用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量缺乏，導(dǎo)致洗板不*;洗板針阻塞，抽吸不*;洗板不暢，導(dǎo)致洗板作用差。③反響板過(guò)多形成洗板等候時(shí)刻長(zhǎng)。
解決辦法： ①確保洗液注滿各孔，洗板針疏通，洗完板后在吸水紙(挑選潔凈、無(wú)或少塵的吸水資料)上輕輕拍干; ②合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
3. 顯色
可能原因：①顯色劑后放置時(shí)刻過(guò)長(zhǎng)或運(yùn)用過(guò)期顯色劑; ②加顯色劑時(shí)濺起孔外形成液體回流。
解決辦法：①顯色劑盡量在臨用前，堅(jiān)持不期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不必;②加樣時(shí)保持顯色劑不外流; ③A、B液應(yīng)防止觸摸金屬器械。
4. 挑選試劑
挑選質(zhì)量的檢測(cè)試劑，嚴(yán)厲依照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
5 加樣
可能原因：①血清或血漿標(biāo)本別離欠好即進(jìn)行加樣;②手藝操作中，加樣板過(guò)多形成加樣后放入孵箱前等候時(shí)刻過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí));③加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺起孔外。
解決辦法：①標(biāo)本為血清：將血液先天然寄存1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿：有必要運(yùn)用含抗凝劑的血液標(biāo)本搜集管，豚鼠elisa試劑盒采血后有必要當(dāng)即倒置混合5-10次，放置一段時(shí)刻后，3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要儲(chǔ)存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。② 加樣后及時(shí)放入孵箱。③加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板外表輕拭吸干。④如果選用AT或其他全自動(dòng)加樣，挑選FAME或其他后處理儀器加酶試劑。⑤標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
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