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BT-549人乳腺管癌細胞培養?操作說明

2023-8-23  閱讀(88)

BT-549人乳腺管癌細胞培養操作說明:

1)對于常溫運輸的細胞,收到細胞后,檢查是否有運輸問題,即細胞培養瓶或管是否破損,細胞培養液是否溢出。若沒有運輸問題,請75%酒精消毒后,保留封口膜,放入細胞培養箱中靜置。嚴格檢查培養箱的參數:溫度,濕度和CO2濃度。細胞靜置時間一般為6-12小時后,細胞狀態穩定后,即可開始后續操作。選用正確的細胞培養體系,A2780(人卵巢癌細胞)嚴格按照說明書的培養條件進行培養。條件允許,培養的前三天內做細胞拍照記錄,通過郵件發送給我們做及時狀態跟蹤。

2)對于干冰運輸的細胞,請取出冷凍管后,須立即放入37C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發生污染情形。然后將其復蘇培養,次日更換培養液。

1)細胞漂浮:培養瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養箱。次日觀察,如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以離心去掉,留10ml培養液培養觀察,細胞生長至匯合度80%,進行消化傳代;如細胞還是不貼壁,將細胞離心收集轉到新培養瓶,原培養瓶加部分培養液繼續培養,中間注意觀察,我們的技術人員會一直跟蹤指導,直到問題解決。

2)對于生長緩慢的貼壁細胞:可采用適當的提高培養基中血清濃度,或隔日換液的方法來保證細胞的狀態和生長速度。

3)對于生長不均的貼壁細胞:在培養過程中若出現細胞分布明顯不均時(即某一區域細胞已重疊生長,而旁邊則為一塊空白),此時可將細胞進行消化,重新打散,貼壁,加入新培養基進行培養。 

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