7.用1L0.15MNaCl溶液常溫避光透析4小時除去未標記上的Cy3。
注射200μL(0.5mg/g)[用量和時間需要客戶根據自己的儀器和藥物試劑等條件優化],每5min記錄1
分子結構： 一般性質：外觀：紅色粉末分子量：590.15質譜分析M+增量：474.2分子式：C34H40ClN3O4溶解性：溶于有機溶劑（DMF,DMSO,二氯甲烷），不溶于水質控：NMR1H（95%）和13C,TLC,功能測試
菁染料是性能優良的熒光標記染料，摩爾吸光系數在熒光染料中是較高的，其琥珀酰亞胺酯是常
分子結構：一般性質：外觀：深紅色粉末分子量：631.67質譜分析M+增量：516.2分子式：C37H33N3O7CAS號：117491-83-5溶解性：易溶于有機溶劑（DMF,DMSO），略溶于水質控：NMR1H（95%）和13C,TLC,功能測試
分子結構：一般性質：外觀：暗藍色粉末分子量：616.19分子式：C36H42ClN3O4溶解性：易溶于有機溶劑（DMF,DMSO和氯化物），難溶于水質控：NMR1H（95%）和13C,TLC，功能測試
另外，Cy5，Cy5.5和Cy7的吸收在近紅外區背景非常低，熒光強度高、穩定的長波長染料。特別適合于活體小動物體內成像代替放射性元素。但由于菁染料，尤其是不對稱菁染料的合成副反應多，副產物極性相近，產物的分離提純相當復雜。
Cy3.5NHS酯是標記多肽，蛋白和寡核苷酸的活性染料Cy3.5NHS酯可替代AlexaFluor594,DyLight594的NHS酯
光譜性質：大激發波長：673nm在大激發波長下的消光系數：209000Lmol-1cm-1大發射波長：707nm熒光量子產率：0.2
F/P值分別是0.28:1,1.16:1,2.3:1和4.6:1。
F/Pfinal=[dye]/[peptide]={0.68×A650}/{A280-(0.05×A650)}
5.用0.1MNaHCO3稀釋少量的抗體，在280nm處測其紫外吸收值計算標記抗體的總量(IgGantibody
Cy5.5NHS酯標記多肽，蛋白和寡核苷酸的氨基Cy5.5NHSester：是近紅外染料，除了用于標記多肽，蛋白和寡核苷酸氨基的活性染料，可用于后續的小動物活體成像實驗。染料可代替AlexaFluor680NHSester和DyLight680NHSester
000M-1cm-1;Cy5在280nm處的吸收是650nm處的5%。按以下公式計算F/P值。
不同蛋白的摩爾吸光系數不一樣;.Cy3染料本身在280nm的吸收是552nm處的8%。按以下公式計算F/P
3.用HPLC純化蛋白，使用蛋白C18柱子(25cm×10mm)，每次上樣注入2×400μL，30分鐘梯度洗脫
從0.1%TFA水溶液到MeCN∶H2O(0.1%TFA)=70∶30，流速4mL/min。(對不同的蛋白選擇不
脫鹽，用5.0mMborate緩沖液平衡到pH=8.0，然后用以上硼酸緩沖液沖下OLIGO。然后濃縮至干的樣
1.在1L0.15MNaCl溶液中透析anti-GST抗體(濃度為0.5mLat3mg/mL)，常溫透析4小時。
分子結構：
F/P計算：
Cy7檢測時激發波長700～770nm帶通,發射波長790nm長通。液晶可調諧濾光片掃描范圍780～
3.1水溶性Cy3NHS標記anti-GST多克隆抗體
[Cy5dye]=(A650)/250000
2.菁染料琥珀酰亞胺酯(CyDyeNHS)的標記
注意：Oligonucleotides和oligopeptides由于太小經常會留在過濾膜上或在凍存管內貼壁
4.用0.22μm注射器過濾頭過濾抗體溶液。
未開封的粉末在避光干燥-20℃存放12月。CyDyeNHS水溶液現配現用不能儲存。任何溶解后的CyDye
ROX（羅丹明X又叫R101）是具有多種用途的高熒光性，不感光的羅丹明染料。ROX標記的寡核苷酸探針經常被用于qPCR及具有ROX通道的qPCR設備標記多肽，蛋白和氨基-寡核苷酸的活性染料，此染料可代替AlexaFluor568
分子結構：一般性質：外觀：暗紫色粉末分子量：732.35分子式：C45H50ClN3O4溶解性：溶于有機溶劑（DMF,DMSO，二氯甲烷），不溶于水質控:NMR1H（95%）和13C,TLC，功能測試
一般性質：外觀：深藍色粉末分子量：716.31分子式：C44H46ClN3O4溶解性：溶于有機溶劑（DMSO,DMF,二氯甲烷），在水中不易溶解質控：NMR1H(95%)13C,TLC,功能測試
8.在4°C用新鮮的1L0.15MNaCl溶液再避光透析過夜。
光譜性質：大激發波長：591nm在大激發波長下的消光系數：116000Lmol-1cm-1熒光量子產率：0.35
后避光保存。
光譜性質：大激發波長：646nm在大激發波長下的消光系數：250000mol-1cm-1大發射波長：662nm熒光量子產率：0.2
滌掉所有的殘余氨水。然后將樣品真空干燥;然后溶于0.25ml的0.5MNaCl溶液中，用SephadexG-50
11.用0.01MPBS/0.01%N3 化鈉整數倍稀釋標記抗體溶液，測量280nm(蛋白)和552nm(Cy)處
分子的生物活性，標記生物分子用單琥珀酰亞胺酯較合適，但是用雙修飾的CyDyeNHS并沒有發現交聯。
5.產品冷凍干燥成粉末或在水溶液中，-20℃避光儲存;必要時可用質譜表征。
Cy3NHS酯是標記生物分子氨基的活性染料，此試劑可標記溶解蛋白，多肽和寡核苷酸/DNA。對于比較敏感的蛋白請選擇無需任何共溶劑的，可溶于水的磺酸基-Cy3NHS酯。
Cy5在生命科學研究和診斷領域是非常常用的熒光團。此熒光團在紅色區域有大發射，許多CCD檢測器有大靈敏度。Cy5NHS酯是標記多肽，蛋白和寡核苷酸的活性染料。染料需要少量的有機共溶劑（比如DMF和DMSO）溶解后進行標記反應。此試劑可以標記溶解蛋白和各種多肽，寡核苷酸的氨基。對于易降解的蛋白，不可使用DMF或DMSO，應選擇我們的不需任何共溶劑的sulfo-Cy5NHS酯，兩者具有非常相似的熒光特性。
CyDyemono-reactiveNHSEsters(菁染料琥珀酰亞胺酯)
長度,可改變其熒光發射波長，每增加一個雙鍵，按照Huoffman規則正好紅移約100nm。
光譜性質：大激發波長：555nm在大激發波長下的消光系數：150000Lmol-1cm-1大發射波長：570nm熒光量子產率：0.31
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