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兩種產品的選擇區別
細胞培養是實驗室里zui常見和zui基本的實驗了，但卻不是zui簡單的。別小看細胞培養，這里可蘊含著大學問。有時候細胞狀態不好，轉染、藥篩這些實驗根本就沒辦法做。影響細胞培養的因素很多，讓我們先從培養基和血清說起。
經典的培養基有很多種，Invitrogen（GIBCO）、Thermo Fisher（HyClone）、Sigma等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應用zui廣泛的培養基。其他如M199、IMDM、L15培養基等也用于某些細胞的培養。
◆MEM是由Eagle’s基礎培養基（BME）發展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度。
◆Dulbecco改良的BEM（DMEM）培養基是為小鼠成纖維細胞設計的，現在常用于貼壁細胞的培養。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的4倍，采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。zui初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L，后來為了某些細胞的生長需要，將葡萄糖含量又調整為4500 mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了。
◆aMEM含有附加的氨基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應用于各種細胞類型，包括對營養成分要求苛刻的細胞。
◆Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的，現在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養。F12還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產物，這種培養基已應用于許多原代培養及更難養的細胞系的培養。
◆RPMI 1640培養基是專為淋巴細胞培養而設計的，現在已廣泛應用于懸浮細胞的培養。
以前經常聽到有人問，這種細胞該用哪一種培養基呢?其實這個問題的答案可以很簡單，也可以好復雜。此話怎講?如果這種細胞是購自ATCC或其他的細胞庫，那很簡單，問供應商就行了。或者找到相關的文獻，作為參考。Invitrogen上有一個Cell Line Database的工具，也很好用。選擇你感興趣的細胞類型，它就會彈出推薦的培養基、血清和轉染試劑等，有時還有優化好的轉染步驟，很方便。Sigma上也有一個Media Expert，包括了培養基所有成分的功能描述、使用推介和參考文獻等，它還是一個解決問題能手，對于細胞培養中的常見問題，如細胞貼壁不好、培養基變色等，它都會列出可能的原因，并提供補救辦法。這個Expert果然不簡單!
但如果你是著手建立一種全新細胞的培養體系，根本找不到任何參考，那你就得花點時間自己試驗了。萬事開頭難嘛。因為沒有一個標準答案。在MEM中培養的細胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之，MEM做貼壁細胞培養、RPMI 1640做懸浮細胞培養會是一個好的開始。你也可以購買幾種培養基來，然后花大約兩周的時間做一個簡單的細胞生長實驗，來選擇其中的。有時候你會驚訝地發現你的*培養條件與文獻報道的不同，就算是同一種培養條件，細胞的生長狀態也時好時壞，這是很正常的。因為試劑、水、不同批號的血清之間都存在著差異。要提高培養基的穩定性，可以從培養基和血清兩方面入手。
以前大部分實驗室都是用干粉培養基，但配制過程就較為繁瑣，要溶解、調pH值，過濾，過程中可能會產生一些濃度誤差，而且有些實驗室的水質并不理想，所以培養的效果會有差異。如果使用液體培養基，這種人為的誤差會減少，因為畢竟是大批量工業化生產的，批間差會很小。大家是不是感覺液體培養基會貴很多，以前是這樣，但現在非也。HyClone和Invitrogen都在國內建立了液體培養基的生產基地，生產和運輸成本大幅降低，所以現在的價格也只是50-60元/500ml，比干粉培養基貴不了多少，而且還幫你省了過濾器和時間。
血清含有生長因子可促進細胞的繁殖，含有附著因子可促進細胞的貼壁，同時還具有抗胰酶活性。血清同時也是礦物質、脂類及激素的來源。zui常用的血清有小牛血清、新生牛血清、胎牛血清和馬血清等。牛血清是按照采血時間的早晚來分類的。采血時間越早，營養物質越豐富，所含抗體也越少，因而胎牛血清適合要求高的細胞系和克隆化培養。由于瘋牛病的原因，到目前為止，我國政府仍然禁止從北美洲、歐洲和日本等地區進口牛血清，因此市面上的牛血清大多來自澳洲、南美洲，或是國產的。
而血清批次間的差別就是不可避免的，這種差異來源于不同的制備方法和除菌方法、動物的年齡差別及血清的儲存條件等，而且與取血動物的來源關系密切。不同的牧場、不同的氣候天氣及其他環境因素都可能影響血清的質量。因此選好了一種血清就要盡可能長期使用它。在需要更換時，也要盡量保持與原有的一批血清相似。現在很多公司都提供血清預留，你一旦選定了某個批次的血清，備足一年的量，這樣可以避免很多麻煩。
血清固然是細胞培養中*的成分，但正如上文所說，血清的批間差異大，更換血清時需要做大量的測試以取保替換的血清與原來的相似。而血清的供應也是必須要考慮的因素。由于氣候或瘋牛病的影響，說不定哪天血清就突然沒得賣了，那對實驗的影響可非同小可。另外，血清的價格也很昂貴，雖說現在也有便宜的國產血清，但是高品質的澳洲血清價格仍舊高企。因此，也有一些實驗室開始換用無血清培養基。
無血清培養基（Serum-Free Media），通常以SFM表示，顧名思義，就是在細胞培養中不需要添加血清，但是在某些應用中可能要添加生長因子或細胞因子。無血清培養基中添加了血清的主要成分：粘附因子、生長因子、必需的營養物質和激素等，能減少上述血清帶來的不利因素，使細胞培養的條件更穩定。但它也不是的，從有血清培養過渡到無血清培養的條件并不像想象中那么直截了當。處于發育的不同分化階段的細胞（例如干細胞與定向前體細胞相比）需要不同的配方，對生長因子和細胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時，也去除了一些血清蛋白具有的保護、解毒作用，因此對試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。另外，它的價格也比普通的培養基貴很多。
上海勁馬實驗設備有限公司是一家專注于生命科學和生物技術領域的企業。從事生物技術領域相關產品的開發，銷售和技術服務。我們的主營業務為：ELISA試劑盒，化學試劑， 胎牛血清，人血清，抗體，重組蛋白，標準品，以及耗材等。
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