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大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒技術(shù)參數(shù)

2017年05月16日 10:57:33人氣:261來源:上海莼試生物技術(shù)有限公司

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關(guān) 鍵 詞大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素,CRH,ELISA試劑盒
【資料簡(jiǎn)介】

大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)泡素(FSH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH),再與 HRP標(biāo)記的大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)抗體,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗。用純化的大鼠促卵滌后加底物 TMB顯色。TMB在   HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在  450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)濃度。
標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因   NaN3抑制辣根過(HRP)活性。
大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋。

2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50ml,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40ml,然后再加待測(cè)樣品 10ml(樣品zui終稀釋度為 5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有析出,稀釋時(shí)可在浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在 5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,*使用排槍加樣。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本  OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的 OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

上海莼試生物技術(shù)有限公司作者

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