500 毫摩爾超氧陰離子清除劑TEMPOL 溶液產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

【資料簡(jiǎn)介】

500 毫摩爾超氧陰離子清除劑TEMPOL 溶液產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）
主要用途
500 毫摩爾超氧陰離子清除劑TEMPOL 溶液是一種旨在模擬超氧化物歧化酶的功能，清除超氧自由基陰離
子的輔助試劑。其適用于氧化應(yīng)急活性氧等研究。其適用于各種細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中超氧自由基陰離子
的清除。產(chǎn)品即到即用，嚴(yán)格無(wú)菌，性能穩(wěn)定，高純活性。
技術(shù)背景
4-羥基-2,2,6,6,-四甲基哌啶氧（4-hydroxy-2,2,6,6-tetramethylpiperidinyloxy；TEMPO）是一種自旋標(biāo)記（spin
label）的水溶性穩(wěn)定哌啶氮氧化合物（piperidine nitroxide），分子式是C9H18NO2，分子量為172.24。其主
要作用在于自由通過(guò)質(zhì)膜，具有超氧化物歧化酶的功能，清除超氧自由基陰離子，起到活性氧的解毒作用，
同時(shí)具有神經(jīng)保護(hù)、抗炎和鎮(zhèn)痛作用。
產(chǎn)品內(nèi)容
清除劑（Reagent A） 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1 份
保存方式
保存在－20℃冰箱里，避免光照；有效保證6 月
用戶(hù)自備
*細(xì)胞培養(yǎng)液：用于支持細(xì)胞生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)液
細(xì)胞培養(yǎng)板（瓶）：用于細(xì)胞培養(yǎng)的容器
蓋玻片：用于細(xì)胞生長(zhǎng)的載體
臺(tái)式離心機(jī)：用于懸浮細(xì)胞的收集
細(xì)胞培養(yǎng)箱：用于細(xì)胞孵育
15 毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器
實(shí)驗(yàn)提示
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將－20℃冰箱里的清除劑（Reagent A）置于冰槽里融化。然后進(jìn)行下列操作：
方法一：貼壁細(xì)胞處理
1． 在6 孔細(xì)胞培養(yǎng)板里的1 孔放置蓋玻片
2． 加入2 毫升用戶(hù)自備的*細(xì)胞培養(yǎng)液
3． 加入1 毫升待測(cè)細(xì)胞（1 至5 X 105 細(xì)胞）
4． 輕輕搖動(dòng)，使細(xì)胞均勻分布
5． 放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱孵育，直至細(xì)胞生長(zhǎng)到50％鋪滿(mǎn)率
6． 小心抽掉細(xì)胞培養(yǎng)液
7． 加入3 毫升新鮮的用戶(hù)自備的*細(xì)胞培養(yǎng)液
8． 加入xx 微升清除劑（Reagent A）
9． 輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)板，混勻
10．放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱孵育24 小時(shí)
11．小心抽掉含有清除劑（Reagent A）的細(xì)胞培養(yǎng)液
12．繼續(xù)后續(xù)操作
方法二：懸浮細(xì)胞處理
1． 準(zhǔn)備1 個(gè)25cm2 細(xì)胞培養(yǎng)瓶
2． 加入2 毫升用戶(hù)自備的*細(xì)胞培養(yǎng)液
3． 加入1 毫升待測(cè)細(xì)胞（5 X 105 細(xì)胞）
4． 輕輕搖動(dòng)，使細(xì)胞均勻分布
5． 放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱孵育24 小時(shí)
6． 小心移出細(xì)胞培養(yǎng)液到15 毫升錐形離心管
7． 放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心10 分鐘，速度為300g
8． 小心抽掉上清液
9． 加入3 毫升新鮮的*細(xì)胞培養(yǎng)液，混勻細(xì)胞顆粒群
10．加入xx 微升清除劑（Reagent A）
11．輕輕搖動(dòng)離心管，混勻
12．放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱孵育24 小時(shí)
13．放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心10 分鐘，速度為300g
14．小心抽掉含有清除劑（Reagent A）的細(xì)胞培養(yǎng)液
15．繼續(xù)后續(xù)操作
方法三：動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
1． 準(zhǔn)備1 個(gè)待測(cè)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2． 靜脈注射xx 微升清除劑（Reagent A）/100 克動(dòng)物體重
3． 或腹腔注射xx 微升清除劑（Reagent A）/100 克動(dòng)物體重
4． 或輸液/灌注xx 至xx 微升清除劑（Reagent A）/100 克動(dòng)物體重
5． 注射后30 分鐘至4 小時(shí)繼續(xù)后續(xù)麻醉、斷頸椎、解剖、組織制片等操作
注意事項(xiàng)
1． 本產(chǎn)品為1 毫升規(guī)格（100 倍濃度）
2． 本產(chǎn)品即到即用，無(wú)需進(jìn)行任何處理
3． 使用時(shí)，戴好手套
4． 避免反復(fù)凍融
5． 使用時(shí)，避免污染母液
6． 細(xì)胞孵育時(shí)間可以根據(jù)用戶(hù)的具體情況調(diào)整，通常為6 小時(shí)至24 小時(shí)
7． 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)可以每天注射，持續(xù)1 周，然后觀察分析
8． 本公司提供系列活性氧清除試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定嚴(yán)格無(wú)菌