ELISA試劑盒的測(cè)讀結(jié)果更穩(wěn)定

【資料簡(jiǎn)介】

    應(yīng)注意可測(cè)范圍與線性范圍的不同，線性范圍常小于可測(cè)范圍，比如某一酶標(biāo)儀的可測(cè)范圍為0.000~2.900，而其線性范圍僅0.000~2.000，這在定量ELISA試劑盒中制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)應(yīng)予注意。酶標(biāo)比色儀簡(jiǎn)稱酶標(biāo)儀，通常指于測(cè)讀 ELISA試劑盒結(jié)果吸光度的光度計(jì)。針對(duì)固相載體形式的不同，各有特制的適用于板、珠和小試管的設(shè)計(jì)。許多試劑公司配套供應(yīng)酶標(biāo)儀。酶標(biāo)儀的主要性能指標(biāo)有：測(cè)讀速度、讀數(shù)的準(zhǔn)確性、重復(fù)性、度和可測(cè)范圍、線性等等。

    優(yōu)良的酶標(biāo)儀的讀數(shù)一般可到0.0 01， 準(zhǔn)確性為±1%，重復(fù)性達(dá)0.5%。舉例說(shuō)，若某孔測(cè)得的A 值為1.083，則該孔相對(duì)于空氣的真實(shí)A 值應(yīng)為1.083± 0.01(1.073~1.093 ），重復(fù)測(cè)定數(shù)次，其A 值均應(yīng)1.083±0.05（1.078~1.088 ）在之間。酶標(biāo)儀的可測(cè)范圍視各酶標(biāo)儀的性能而不同。普通的酶標(biāo)儀在0.000~2.000，新型號(hào)的酶標(biāo)儀上限拓寬達(dá)2.900，甚至更高。ELISA試劑盒超出可測(cè)上限的A 值常以"*"或"over"或其它符號(hào)表示。
    酶標(biāo)儀不應(yīng)安置在陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下，操作時(shí)室溫宜在15~30℃，使用前先預(yù)熱儀器15-30 分鐘。測(cè)讀 A 值時(shí)，要選用產(chǎn)物的敏感吸收峰，如OPD 用492nm 波長(zhǎng)。有的酶標(biāo)儀可用雙波長(zhǎng)式測(cè)讀，即每孔先后測(cè)讀兩次，*次在zui適波長(zhǎng)（W1），第二次在不敏感波長(zhǎng)（W2），ELISA試劑盒兩次測(cè)定間不移動(dòng)ELISA 板的位置。例如OPD 用492nm 為W1，630nm 為W 2，zui終測(cè)得的A 值為兩者之差（W1-W2）。雙波長(zhǎng)式測(cè)讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。各種酶標(biāo)儀性能有所不同，使用中應(yīng)詳細(xì)新聞?dòng)浾哒f(shuō)明書(shū)。