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魚(yú)皮質(zhì)醇ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

2016年06月07日 09:33:29人氣:797來(lái)源:深圳子科生物科技有限公司

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關(guān) 鍵 詞魚(yú)皮質(zhì)醇ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū),Cortisol
【資料簡(jiǎn)介】

魚(yú)( Fish )皮質(zhì)醇( Cortisol )ELISA 檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
檢測(cè)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA) 。 往預(yù)
先包被皮質(zhì)醇(Cortisol)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)
品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色 ,
TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色, 并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終
的黃色。顏色的深淺和樣品中的皮質(zhì)醇(Cortisol)呈正相關(guān)。用酶
標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值) ,計(jì)算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞
刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地
分離。
2. 血漿: EDTA、 檸檬酸鹽或肝素抗凝。 3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘
取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于
-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭: 0.5-10uL、 2-20uL、 20-200uL、 200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
操作注意事項(xiàng)
1. 試劑盒保存在 2-8℃,使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的
濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解
后再使用。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中, 密封 (低溫干燥) 保存。
3. 濃度為 0 的 S0 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白;按照說(shuō)明
書(shū)操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋 5 倍,zui終結(jié)果乘以 5 才是樣本實(shí)際濃度。
4. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻

詳細(xì)說(shuō)明書(shū)見(jiàn)附件!

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