17-羥皮質類固醇（17-OHCS）ELISA試劑盒半價選購

【資料簡介】

通用名：17-羥皮質類固醇（17-OHCS）酶聯免疫分析試劑盒

17-羥皮質類固醇（17-OHCS）ELISA試劑盒使用目的：
本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關組織樣本中17-羥皮質類固醇（17-OHCS）含量。

17-羥皮質類固醇（17-OHCS）ELISA試劑盒實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人17-羥皮質類固醇（17-OHCS）水平。用純化的人17-羥皮質類固醇（17-OHCS）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入17-羥皮質類固醇（17-OHCS），再與HRP標記的17-OHCS抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的17-羥皮質類固醇（17-OHCS）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人17-羥皮質類固醇（17-OHCS）濃度。

17-羥皮質類固醇（17-OHCS）ELISA試劑盒標本要求
1．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
2．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

17-羥皮質類固醇（17-OHCS）ELISA試劑盒操作步驟
1.         標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在*、第二孔中分別加標準品100μl，然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為24μg/L，16μg/L ，8μg/L，4μg/L，2μg/L）。
2.         加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.         溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
4.         配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5.         洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6.         加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7.         溫育：操作同3。
8.         洗滌：操作同5。
9.         顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10.     終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉）。
11.     測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。V