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技術(shù)中心

精子活力和頂體形態(tài)雙重熒光染色試劑盒產(chǎn)品說明書

2015年05月05日 15:02:05人氣:734來源:上海哈靈生物科技有限公司

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關(guān) 鍵 詞生物試劑,化學試劑,試劑盒
【資料簡介】

主要用途


  精子活力和頂體形態(tài)雙重熒光染色試劑是一種旨在使用赫斯特33258和熒光素標記的花生凝集素雙重熒光染色技術(shù),分析精子活力以及頂體狀態(tài)而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適用于各種動物或人體精子細胞以及凍存精子細胞的檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡便,性能穩(wěn)定,熒光清晰。


技術(shù)背景


在男科學Andrology中,精子(spermatozoa)分析提供了精子生成(spermatogenesis)、精子壽命、以及生育能力的基礎(chǔ)信息。其中精子的活力(vitality)、運動能力(motility)、授精潛力(fertilizing potential)、膜結(jié)構(gòu)或染色質(zhì)結(jié)構(gòu)完整性(integrity)、頂體反應(yīng)(acrosomal reaction)功能的評價是精子分析的重要指標,也是決定人工受孕或體外授精(in vitro fertilizationIVF)的重要參數(shù)。其中頂體反應(yīng),是指當精子接近卵子實施授精時,精子頭部前半端的帽狀結(jié)構(gòu)頂體,釋放出溶解酶,以便精子和卵子的膜融合。頂體反應(yīng)測試是一項穩(wěn)定的精子功能參數(shù),可以用于預(yù)測受精成功率。因此頂體的結(jié)構(gòu)完整性(intact)是評價的主要標志,也是不育癥和避孕藥物研究的對象。使用DNA敏感性熒光染料赫斯特33258(Hoechst 33258)和熒光素標記的花生凝集素(Isothiocyano-fluoresceinated peanut Arachis hypogaea agglutinin;PNA-FITC雙重熒光染色技術(shù),是精子活力,以及精子頭部頂體狀態(tài)分析和授精效率評價的zui常用的方法。首先使用赫斯特33258染色,分析精子活力,基于赫斯特33258具有有限的膜通透性特點,受到活體精子細胞(包括游動性和非游動性精子)的排斥,而容易進入死亡精子細胞。其次使用熒光素標記的花生凝集素染料,與頂體外膜糖蛋白上的半乳糖殘基(β-D-galactosyl residue)的結(jié)合,顯示完整性(未反應(yīng)性unreacted)頂體,同時可以應(yīng)用于受精時的精卵反應(yīng)。雙染的作用,以幫助區(qū)分生理性反應(yīng)性頂體缺失(loss)或病理性退行性頂體缺失。通過常用的熒光顯微鏡(激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長530nm)便可清晰觀察到綠色頂體狀態(tài)(status)。

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