細菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產品說明書

【資料簡介】

主要用途

 細菌異檸檬酸脫氫酶（ISOCITRATE DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過反應系統中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酸（NADP）還原后峰值的變化，即采用比色法來測定細菌裂解樣品中酶活性的而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種細菌細胞裂解懸液樣品異檸檬酸脫氫酶的活性檢測。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩定。

技術背景

異檸檬酸脫氫酶（isocitrate dehydrogenase；IDH；EC1.1.1.42）是三羧酸循環（citric acid cycle）或克雷布斯循環（Krehes cycle）中的酶之一，存在于所有生物體內。細菌異檸檬酸脫氫酶有2種同工酶：同源雙體，40至45Kd分子量；單體，80至100Kd分子量。在細菌體內，氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸（oxidized β-Nicotinamide adenine dinucleotide –phosphate；NADP）依賴性異檸檬酸脫氫酶獲得輔酶NADP和輔助因子錳或鎂離子（Mn）的推動，脫去底物異檸檬酸的氫和二氧化碳（氧化性脫羧基作用），轉化為α-酮戊二酸（α-ketoglutarate），同時生成還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸（reduced β-Nicotinamide adenine dinucleotide –phosphate；NADPH）。一旦磷酸化或在乙酸環境中，以及有限的葡萄糖條件下，異檸檬酸脫氫酶則失活，從而控制三羧酸循環和乙醛酸旁路（glyoxylate bypass）之間碳的流動。基于異檸檬酸脫氫酶的NADP依賴性，和作用后所產生的NADPH，通過分光光度儀的峰值變化（340nm 波長），來定量分析異檸檬酸脫氫酶的活性。異檸檬酸脫氫酶反應系統為：