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大鼠內皮素酶聯免疫試劑盒使用說明書
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關 鍵 詞 | 大鼠內皮素酶聯免疫試劑盒,大鼠內皮素酶聯免疫試劑盒使用說明書 |
- 【資料簡介】
大鼠內皮素酶聯免疫試劑盒概述
內皮素是一種由21個氨基酸組成的活性多肽,為目前已知縮血管活性zui強的物質。在生理狀態下,由于內皮細胞合成內皮素很少且清除速度快,故血漿中內皮素濃度很低。 但在內皮細胞損傷、組織缺血缺氧等情況下,內皮細胞大量合成內皮素并釋放入血,成為參與疾病病理生理過程的重要體液因素。 實驗原理 本試劑盒應用雙抗體夾心酶標免疫分析法測定標本中內皮素水平。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入內皮素、生物素化的抗大鼠內皮素抗體、HRP標記的親和素,經過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的內皮素呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
預期應用 ELISA法定量測定大鼠血漿或其它相關液體中內皮素1(ET-1)含量。
大鼠內皮素酶聯免疫試劑盒試劑盒組成
1. 酶聯板:一塊(96孔)
2. 標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,其濃度為10000 pg/mL,做 系列倍比稀釋后,分別稀釋成10000 pg/mL,5000 pg/mL ,2500 pg/mL,1250 pg/mL,625 pg/mL,312 pg/mL,156 pg/mL,其原液直接作為zui高標準濃度,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/mL,臨用前15分鐘內配制。 如配制5000 pg/ml標準品:取0.5ml 10000 pg/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。 5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A1:100稀釋。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B1:100稀釋。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
11. 標本的采集及保存
1.血清:標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響zui后大鼠內皮素酶聯免疫試劑盒檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
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