小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGF-β1）酶聯(lián)免疫分析免費(fèi)代測

【資料簡介】

 免費(fèi)代測ELISA試劑盒一周內(nèi)出結(jié)果

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產(chǎn)品說明書，詳細(xì)信息，產(chǎn)品價格，請。

主營產(chǎn)品： ELISA試劑盒，生物試劑，免疫組學(xué)，生物抗體，蛋白組學(xué)，分子生物等。

試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍：                                                           96T

3pg/ml-120pg/ml

使用目的：

本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中轉(zhuǎn)化生長因子β 1（TGF-β1）含量。實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β 1（TGF-β1）水平。用純化的小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGF-β1）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入轉(zhuǎn)化生長因子β 1（TGF-β1），再與HRP標(biāo)記的轉(zhuǎn)化生長因子β 1（TGF-β1）抗體結(jié)合，形成抗體 -抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGF-β1）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm波長下測定吸光度（ OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β 1（TGF-β1）濃度。

試劑盒組成

 

1	30倍濃縮洗滌液		20ml×1瓶		7	終止液	6ml×1瓶
2	酶標(biāo)試劑		6ml×1瓶		8	標(biāo)準(zhǔn)品（240pg/ml）	0.5ml×1瓶
3	酶標(biāo)包被板		12孔×8條		9	標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液	1.5ml×1瓶
4	樣品稀釋液		6ml×1瓶		10	說明書	1份
5	顯色劑 A液		6ml×1瓶		11	封板膜	2張
6	顯色劑 B液		6ml×1/瓶		12	密封袋	1個
120pg/ml		5號標(biāo)準(zhǔn)品		150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
60pg/ml		4號標(biāo)準(zhǔn)品		150μl的 5號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
30pg/ml		3號標(biāo)準(zhǔn)品		150μl的 4號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
15pg/ml		2號標(biāo)準(zhǔn)品		150μl的 3號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
7.5pg/ml		1號標(biāo)準(zhǔn)品		150μl的 2號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

 

 

標(biāo)本要求

1           標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于 -20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2           NaN3的樣品，因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的（ HRP）活性。

 

操作步驟

1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl（樣品zui終稀釋度為 5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 3 0分鐘。

4.配液：將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30倍稀釋后備用

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30秒后棄去，如此重復(fù) 5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同 3。

8.洗滌：操作同 5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻， 37℃避光顯色15分鐘.

10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

 

11.測定：以空白空調(diào)零， 450nm波長依序測量各孔的吸光度（ OD值）。測定應(yīng)在加終止液后 15

 

分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

 

操作程序總結(jié)：

計算

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)， OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的了解更多詳細(xì)信息

 

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