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熒光素標記精子發(fā)生相關(guān)的新基因抗體IgG相關(guān)知識
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關(guān) 鍵 詞 | 熒光素標記精子發(fā)生相關(guān)的新基因抗體IgG,Anti-TSARG7/FITC,熒光素標記精子發(fā)生相關(guān)的 |
- 【資料簡介】
熒光素標記精子發(fā)生相關(guān)的新基因抗體IgG相關(guān)知識
Anti-TSARG7/FITC 熒光素標記精子發(fā)生相關(guān)的新基因抗體IgG Anti-TSFP1/SP1 /FITC 熒光素標記SP1轉(zhuǎn)錄生長因子抗體IgG Anti-tsg101/FITC 熒光素標記tsg101抗體IgG Anti-TSHR/FITC 熒光素標記促甲狀腺素受體抗體IgG Anti-TSHR(CT)/FITC 熒光素標記促甲狀腺素受體抗體(C端)IgG Anti-TSHR /FITC 熒光素標記促甲狀腺素受體抗體IgG Anti-TSHR(NT)/FITC 熒光素標記促甲狀腺素受體抗體(N端)IgG Anti-TSLC1/FITC 熒光素標記肺癌腫瘤阻抑基因1抗體IgG Anti-TSLP/FITC 熒光素標記淋巴細胞生成素-1抗體IgG Anti-TTF-1/FITC 熒光素標記甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1/甲狀腺特異增強子結(jié)合蛋白抗體IgG Anti-TTF-2/FITC 熒光素標記甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2抗體IgG Anti-Tubb3/FITC 熒光素標記β微管蛋白-Ⅲ抗體IgG Anti-Tubulin-α/FITC 熒光素標記微管蛋白α抗體IgG Anti-Tubulin-β/FITC 熒光素標記微管蛋白抗體IgG Anti-Tubulin-β/FITC 熒光素標記微管蛋白抗體IgG Anti-β-Actin/HRP 辣根過氧化物酶標記β-肌動蛋白(抗體) Anti-Tubulin-γ/FITC 熒光素標記微管蛋白-γ抗體IgG 免疫檢測
一抗與靶蛋白的結(jié)合
① 封閉的膜用PBST漂洗2-3次。
② 將加樣槽洗滌干凈,用蒸餾水潤洗,晾干,將膜用一次性手套覆蓋好,按標記和實驗設計切下膜條(一般為3 mm寬左右)按順序置于加樣槽中,作好實驗記錄,加入相應的一抗約1ml,注意保證膜的所有部分同溶液接觸。
③ 室溫下于搖床孵育2h或4℃過夜。
④ 棄去一抗,膜條仍置于加樣槽,每個槽加2-3 mlPBST,上搖床洗滌洗滌5-10min ,換液,反復4次。
酶標記二抗與一抗的結(jié)合
① 根據(jù)實驗需要和設計選擇合適的酶標二抗和稀釋濃度(用含0.5%脫脂奶粉的PBS稀釋),每個加樣槽中加入二抗1ml左右室溫下于搖床孵育1h或4℃過夜,注意保證膜的所有部分同溶液接觸。
②棄去二抗,膜條仍置于加樣槽,每個槽加2-3 mlPBST,上搖床洗滌洗滌5-10min ,換液,反復4次。
顯色反應(注:二抗一般有兩種常用標記酶,HRP和AP,其相對應的顯色底物試劑盒為DAB和BCIP/NBT)
① HRP標記二抗顯色
用DAB KIT(KPL LOT NO YM107 CAT:54-10-00)顯色,按順序依次加Tris Buffer 3滴,DAB Substrate 3滴,Peroxide solution 2滴于5ml蒸餾水中,避光,混勻,將膜加入顯色液中避光顯色15 min左右終止反應,記錄實驗結(jié)果,將NC膜晾干掃描保存
② AKP標記二抗顯色
用AKP緩沖液洗膜5min,棄去AP緩沖液,加入顯色液(66µlNBT溶液同10mlAKP緩沖液充分混合均勻后加入33µl BCIP溶液1h內(nèi)使用),室溫下顯色(37℃可加速反應),顯色反應通常在30min內(nèi)可完成。用20mM EDTA/TBS洗膜終止反應,記錄實驗結(jié)果,將NC膜晾干掃描保存。反應溶液可預先配置,可在4℃儲存一年以上。Anti-TSARG7/FITC 熒光素標記精子發(fā)生相關(guān)的新基因抗體IgG Anti-TSFP1/SP1 /FITC 熒光素標記SP1轉(zhuǎn)錄生長因子抗體IgG Anti-tsg101/FITC 熒光素標記tsg101抗體IgG Anti-TSHR/FITC 熒光素標記促甲狀腺素受體抗體IgG Anti-TSHR(CT)/FITC 熒光素標記促甲狀腺素受體抗體(C端)IgG Anti-TSHR /FITC 熒光素標記促甲狀腺素受體抗體IgG Anti-TSHR(NT)/FITC 熒光素標記促甲狀腺素受體抗體(N端)IgG Anti-TSLC1/FITC 熒光素標記肺癌腫瘤阻抑基因1抗體IgG Anti-TSLP/FITC 熒光素標記淋巴細胞生成素-1抗體IgG Anti-TTF-1/FITC 熒光素標記甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1/甲狀腺特異增強子結(jié)合蛋白抗體IgG Anti-TTF-2/FITC 熒光素標記甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2抗體IgG Anti-Tubb3/FITC 熒光素標記β微管蛋白-Ⅲ抗體IgG Anti-Tubulin-α/FITC 熒光素標記微管蛋白α抗體IgG
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