上海博研：大鼠尿素氮（BUN）試劑盒說明書

【資料簡介】

大鼠尿素氮（BUN）標本要求  
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
大鼠尿素氮（BUN）操作步驟
1.  標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。
3200pmol/L  5號標準品  150µl 的原倍標準品加入150µl標準品稀釋液
1600pmol/L  4號標準品  150µl 的5號標準品加入150µl標準品稀釋液
800pmol/L  3號標準品  150µl 的4號標準品加入150µl標準品稀釋液
400pmol/L  2號標準品  150µl 的3號標準品加入150µl標準品稀釋液
200pmol/L  1號標準品  150µl 的2號標準品加入150µl標準品稀釋液
 
 
2.  加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl，
 
 
然后再加待測樣品10µl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡
量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.  溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。      
4.  配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.  洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此
重復5次，拍干。
6.  加酶：每孔加入酶標試劑50µl，空白孔除外。  
7.  溫育：操作同3。
8.  洗滌：操作同5。
9.  顯色：每孔先加入顯色劑A50µl，再加入顯色劑B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
10分鐘.
10.  終止：每孔加終止液50µl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11.  測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。  測定應在加終止
液后15分鐘以內進行。

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