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非洲豬瘟pcr檢測儀的工作原理是什么
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- 【資料簡介】
非洲豬瘟pcr檢測儀的工作原理是什么?【JD-CW16H】,【山東競道光電,十年儀器廠家】,非洲豬瘟PCR檢測儀器的工作原理基于PCR技術。PCR全稱為聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction),是一種利用酶促反應擴增和檢測特定DNA片段的技術。其基本過程可分為取樣、DNA擴增、PCR產物檢測和結果分析幾個步驟。
在非洲豬瘟PCR檢測中,首先需要采集豬體液或組織樣品,從中提取出潛在存在的非洲豬瘟病毒DNA。然后,將提取的DNA加入PCR反應管中,同時添加引物和酶,進行PCR擴增。
引物是設計成與非洲豬瘟病毒的特定DNA片段互補的DNA片段。通過引物的定向作用,擴增出至少1個特定的非洲豬瘟病毒DNA片段。酶的主要作用是協助引物將DNA分子拆開,并將分離的單鏈基因組DNA互補配對連接成可以被擴增的新雙鏈DNA。PCR擴增過程主要分為三步:變性、退火和延伸。
在變性步驟中,將PCR反應管中的混合物加熱至95℃,使基因組DNA雙鏈分離成單鏈。此時引物結合到DNA片段的相應端部,等待下一步退火。
在退火步驟中,溫度被降低至適合引物與目標DNA序列雜合的一定溫度(通常為50℃-60℃)。此時引物與單鏈目標DNA雜合,形成引物-DNA雜交物。
在延伸步驟中,溫度被升高至72℃。此時,添加的熱穩定synthase DNA聚合酶(Taq)酶沿著分離開來的引物向3’端延伸合成新DNA鏈。這個過程將不斷重復,PCR過程中不斷擴增產物,根據PCR循環的次數和閾值判斷非洲豬瘟病毒是否存在。
后,利用凝膠電泳、實時PCR或其他分析方法檢測PCR產物,確定擴增的DNA是否明確表明非洲豬瘟病毒存在。
需要注意的是,PCR技術通常需要高度精密的儀器和試劑,操作過程也要求高度的嚴謹和無菌環境。同時,PCR結果只能說明樣品中存在非洲豬瘟病毒DNA序列,不能確定樣品是否真正感染了非洲豬瘟病毒。因此,需要結合其他檢測技術和相關臨床癥狀進行綜合判斷。
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