研究開發N-磷酸化蛋白質組深度覆蓋分析新方法

【資料簡介】

 

近日，中國大連化學物理研究所生物分子高效分離與表征研究組研究員張麗華和中科院院士張玉奎團隊，發展出N-磷酸化肽段高選擇性富集新方法，并結合肽段的高效分離和高靈敏度鑒定，實現了N-磷酸化蛋白質組的深度覆蓋分析。

 

與研究相對深入的發生在、和側鏈氨基上的蛋白質O-磷酸化修飾相比，發生在蛋白質、和賴氨酸上的N-磷酸化修飾，由于P-N酰胺鍵具有較高的吉布斯自由能，且易發生水解，目前仍缺乏有效的N-磷酸化蛋白質組分析方法，制約了人們對其生物學功能的認識。

 

該團隊研制出具有核殼結構的亞二微米硅球，并通過在硅球表面鍵合雙二甲基吡啶胺雙鋅分子，在中性條件下實現了N-磷酸化肽段的高效、高選擇性、快速富集；通過基于該材料的on-tip富集方法和液質聯用分離鑒定的結合，從HeLa細胞中鑒定到3384個N-磷酸化位點（目前大的哺乳動物N-磷酸化數據集），并發現N-磷酸化位點附近高度表達；建立的N-磷酸化蛋白質組分析新方法為深入研究其生物學功能提供了基礎數據，并為推動醫學、合成生物學等領域的發展提供了技術支撐。