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膠原酶的使用說明書
資料類型 | doc文件 | 資料大小 | 10752 |
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- 【資料簡介】
1.將漂洗、修剪干凈的*成1~2mm3左右小塊
2.將組織塊放入離心管(三角燒瓶)中加入30~50倍體積的*,旋緊蓋子(密封燒瓶)。
3.將燒瓶放入37℃水浴或者37℃孵箱內,每隔3min振搖一次,如能放在37℃的恒溫震蕩水浴箱中則更好。消化時間與組織的類別很有關系,對于某些腫瘤組織或其他較致密結締組織,消化時間4~48h,對于容易消化的組織可以采用37℃震蕩消化15~45min,也可以根據具體情況而定。如組織塊已分散而失去塊的形狀,一經搖動即成細胞團或單個細胞,可以認為已消化充分。上皮組織經膠原酶消化后,由于上皮細胞對此酶有耐受性,可能仍有一些細胞團未*分散,但分散的單個上皮細胞沒有成團的上皮細胞更易生長,因此,如無特殊需要可以不必再進一步處理。
4.收集消化液(有時含個別組織塊及沒有充分消化的組織碎屑則需用100目不銹鋼網過濾),離心1000r/min,5min,去除上清,用Hanks液或者無血清培養液離心漂洗1~2次,去除上清,加培養液制成細胞懸液,接種培養瓶。
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