培養(yǎng)基生產(chǎn)和使用常見問題

【資料簡介】

1.低血清培養(yǎng)基能用肉眼判斷其pH值嗎？
答：低血清培養(yǎng)基中酚紅的含量與普通培養(yǎng)基中的酚紅含量不同，不能通過肉眼觀察或通過經(jīng)驗來判定pH值，建議使用pH計進行測定。
2.*溶液和*的配制方法是什么？
答：以0.2mol/L的 L-*配制為例：稱取L-*2.92g，加注射用水100ml，充分攪拌混勻。用0.2μm濾膜正壓過濾除菌。溶液應(yīng)在4℃下避光保存，2周內(nèi)使用。以7.5% NaHCO3的配制為例：稱取NaHCO37.5g溶于100ml蒸餾水中過濾除菌。
3.什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅？
答：酚紅在培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑：中性時為紅色，酸性時為黃色，堿性時為紫色。酚紅本身對生物制品質(zhì)量并不會產(chǎn)生影響，可以通過純化技術(shù)去除，但酚紅在無血清培養(yǎng)基可能帶來胞內(nèi)鈉/鉀失衡，影響細胞生長，當(dāng)然這種作用能被血清所中和或減輕。酚紅并不是培養(yǎng)基中必需的一種成分，很多國外的疫苗或抗體生產(chǎn)企業(yè)在生產(chǎn)過程中都使用無酚紅培養(yǎng)基。
4.放置在冰箱中的培養(yǎng)基顏色會發(fā)生變化，為什么？
答：培養(yǎng)基保存于4℃冰箱中，培養(yǎng)基內(nèi)CO2 會逐漸溢出，造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中酸堿指示劑（通常為phenol red）的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿后再用于細胞培養(yǎng)將造成細胞生長停滯或死亡。培養(yǎng)基偏堿時，可以通入無菌過濾的CO2，以調(diào)整pH值。