如何培養好PC-3細胞株？

【資料簡介】

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培養基注意事項：

1）：每株細胞株都有它特定使用且已適應的細胞培養基，若使用和原先提供的培養條件不同的培養基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活。 

（BNL CL.2細胞信息：貼壁細胞 培養基、血清：90% 高糖DMEM、10% 胎牛血清）

2）：更換培養基：視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數據上之更換時間，按時更換培養基即可。 

（BRL細胞信息：貼壁細胞    培養基、血清：90% DMEM高糖、10% 胎牛血清）

控制細胞分解葡萄糖(Glucose)的兩個蛋白質對干細胞的形成非常重要。向基因組中插入了四個蛋白質的基因，使成熟的人類細胞轉變成了類早期干細胞的狀態，這一技術稱為細胞重編程(Reprogramming)。

（大鼠C6細胞 來源：通派細胞庫 大鼠膠質瘤細胞）

重編程后的細胞有發育成任意類型細胞的能力，稱為細胞的多能性。人們一直希望由人類成熟細胞轉化成的多能干細胞有朝一日能生成新的組織或器官，用以修復或替代人類的損傷組織或患病組織。

（大鼠RSC96細胞 來源：通派細胞庫 大鼠雪旺細胞）

細胞重編程過程中，它會關閉由葡萄糖產生能量的新陳代謝通路，該通路發生在有氧條件下的線粒體，繼而啟用無氧條件下的糖酵解通路。

（小鼠Ana-1細胞 來源：通派細胞庫 小鼠巨噬細胞）

能量產生通路的轉變對胚胎細胞和組織干細胞很重要，因為它們必須在低氧環境下生存。研究通過對缺氧誘導因子1α和2α(Hypoxia-induced factor 1α and 2α，HIF1α和HIF2α)的功能缺失分析。

（人U-2 OS細胞 來源：通派細胞庫 人骨肉瘤細胞）

研究發現這兩種蛋白質對細胞重編程產生干細胞是必需的，會調控一些下游基因顯著改變細胞行為。為了更詳細地了解HIF1α和HIF2α對細胞的影響，分別激活其中一種，發現當HIF1α單獨被激活時，細胞進入糖酵解通路，由此產生更多的誘導型多能干細胞。

（小鼠MFC細胞 來源：通派細胞庫 小鼠胃癌細胞）

然而單獨激活HIF2α時，細胞不會轉化為干細胞。如果同時激活HIF1α和HIF2α，HIF2α會勝出，阻斷干細胞的形成。深入挖掘發現HIF2α在細胞重編程初期的確能促進細胞向糖酵解通路轉換；

（小鼠RM-1細胞 來源：通派細胞庫 小鼠前列腺癌細胞）

但當該過程持續時間太長時，HIF2α能上調腫瘤壞死因子相關的誘導凋亡配體(TNF-related apoptosis-inducing ligand，TRAIL)的表達，該配體會誘導干細胞凋亡，阻斷干細胞的產生。因而，HIF2α既能促進細胞多能性，也能抑制細胞多能性，這取決于細胞重編程的不同時期。

（人U87 MG細胞 來源：通派細胞庫 人腦星形膠質母細胞）

這一發現有助于干細胞研究。首先，可以用HIF1α大量產生干細胞。其次，可以單獨用HIF蛋白質或結合其他的刺激因子誘導產生干細胞，并淘汰插入基因阻斷細胞重編程這種方法。

（猴RF/6A細胞 來源：通派細胞庫 猴脈絡叢視網膜內皮細胞）

該發現也有助于癌癥研究，HIF1α和HIF2α是正常細胞轉化為癌細胞的重要因子，事實上，活性HIF1α的存在是入侵性疾病的標記。研究人員指出，可以通過在惡性腫瘤細胞早期阻斷HIF1α的表達，或者在后期刺激HIF2α的表達來阻斷腫瘤生長。