ATCC細(xì)胞實(shí)驗(yàn)時(shí)至關(guān)重要的步驟

【資料簡(jiǎn)介】

ATCC細(xì)胞實(shí)驗(yàn)時(shí)至關(guān)重要的步驟
*、重要的洗滌：
不充分的洗滌會(huì)導(dǎo)致差異和高背景，從而帶來不理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如果未結(jié)合的材料殘留在微孔板中，那么它會(huì)增加背景噪音。有必要的話，可增加洗滌液中的鹽濃度，這會(huì)阻止非特異結(jié)合反應(yīng)。如果背景過高，懷疑洗滌不夠時(shí)，可以嘗試增加洗滌次數(shù)。
第二、關(guān)鍵的封閉：
封閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點(diǎn)。這就降低了可產(chǎn)生信號(hào)的抗體非特異結(jié)合的機(jī)會(huì)。如果背景過高，懷疑封閉不充分，那么可以嘗試使用更高濃度的封閉液，或適當(dāng)延長(zhǎng)封閉時(shí)間。
目前主要有兩種類型的封閉液：蛋白和非離子型去污劑。使用的類型須取決于多個(gè)因素，包括微孔板的表面試劑、吸附的抗原、抗體和檢測(cè)試劑。好的封閉液應(yīng)降低非特異性結(jié)合，但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測(cè)試劑發(fā)生相互作用。
第三、抗體濃度須優(yōu)化：
如果試劑稍有不同，則可能需要優(yōu)化抗體的量。非特異的抗體結(jié)合會(huì)增加背景。為了防止這一點(diǎn)，切勿使用過多的一抗或二抗。
第四、檢測(cè)試劑要適量：
進(jìn)口檢測(cè)試劑盒切勿使用過多的檢測(cè)試劑。如果濃度過高，或者未正確稀釋，則會(huì)導(dǎo)致高背景。也不要顯色過度，如有必要，優(yōu)化一下何時(shí)應(yīng)加入終止液。
ATCC細(xì)胞HM tRNA    人小膠質(zhì)細(xì)胞總RNA    10 µg
HDMEC tRNA    人微血管內(nèi)皮細(xì)胞總RNA    10 µg
HDLEC tRNA    人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞總RNA    10 µg
HEK tRNA    人表皮角質(zhì)細(xì)胞總RNA    10 µg
HEK-a tRNA    人表皮角質(zhì)細(xì)胞總RNA    10 µg
HEM-l tRNA    人表皮黑色素細(xì)胞-淺色素總RNA    10 µg
HEM-m tRNA    人表皮黑色素細(xì)胞-中色素總RNA    10 µg
HEM-d tRNA    人表皮黑色素細(xì)胞-深色素總RNA    10 µg
HDF-f tRNA    人成纖維細(xì)胞-胎兒總RNA    10 µg
HDF-n tRNA    人成纖維細(xì)胞-新生兒總RNA    10 µg
HDF-a tRNA    人成纖維細(xì)胞總RNA    10 µg
HHDPC tRNA    人細(xì)胞總RNA    10 µg
HHGMC tRNA    人生發(fā)基質(zhì)細(xì)胞總RNA    10 µg
HHORSC tRNA    人外根殼細(xì)胞總RNA    10 µg
HHIRSC tRNA    人內(nèi)根殼細(xì)胞總RNA    10 µg
HLEC tRNA    人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞總RNA    10 µg
HLF tRNA    人淋巴成纖維細(xì)胞總RNA    10 µg
HOK tRNA    人口腔角質(zhì)細(xì)胞總RNA    10 µg
HGF tRNA    人牙齦成纖維細(xì)胞總RNA    10 µg
HPLF tRNA    人牙周膜成纖維細(xì)胞總RNA    10 µg
HEEpiC tRNA    人食道上皮細(xì)胞總RNA    10 µg
HESMC tRNA    人食道平滑肌細(xì)胞總RNA    10 µg
HIMEC tRNA    人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞總RNA    10 µg
HISMC tRNA    人腸平滑肌細(xì)胞總RNA    10 µg
HCSMC tRNA    人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞總RNA    10 µg
HPMEC tRNA    人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞總RNA    10 µg
HPAEC tRNA    人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞總RNA    10 µg
HPASMC tRNA    人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞總RNA    10 µg
HPAF tRNA    人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞總RNA    10 µg
HPAEpiC tRNA    人肺泡上皮細(xì)胞總RNA    10 µg
HBEpiC tRNA    人支氣管上皮細(xì)胞總RNA    10 µg
HTEpiC tRNA    人氣管上皮細(xì)胞總RNA    10 µgATCC細(xì)胞