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免疫組織化學中組織細胞的包埋
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- 【資料簡介】
1、石蠟包埋法
石蠟是組織切片技術中應用較廣泛的包埋劑,切片石蠟須是經多次過濾后呈半透明狀的 石蠟,熔點為56—58~C的蠟較適宜。
包埋時應注意包埋面必須平整,破碎組織應聚集在一起包埋,并注意一些特殊的包埋 面。包埋蠟的溫度應與組織塊溫度接近,過高會燙傷組織,過低使組織和石蠟分離,不利于切片。
2、體液包埋法
體液標本,如痰液、胃液、尿液、胸腹水等,也可行石蠟包埋。痰液應選用含血液的部分或較為可疑的實體部分,滴上伊紅后,用皺紋紙包好,用10%的中性甲苯固定,再經常規脫水、透明、浸蠟并包埋。新鮮的胃液、尿液、胸腹水等體液標本,倒去上層的澄清液體,將下面渾濁的液體放人離心管中,以2000~3000r/min離心15min,倒去上清液后,以10%中性甲醛固定下面的沉淀物,然后進行脫水、透明、浸蠟和包埋。
3、快速石蠟包埋法
本法適用于沒有冰凍切片設備,進行術中病理診斷的單位,取材時注意應小而且薄。主要過程如下。
(1)將組織放人混合固定液中(40%甲醛10ml,95%乙醇85ml,冰醋酸5m1)。
(2)人純丙酮I,3rain。
(3)人純丙酮Ⅱ,3min。http://www.dgxuda.com/Login/default?Stand_DownLoadOperate
(4)人苯,2min。
(5)人石蠟,5min。
(6)快速包埋后切片、染色封固。
4、冷凍干燥包埋法
冷凍干燥包埋法的基本原理是將新鮮組織低溫速凍,再利用真空排除組織內所有水分,使石蠟直接浸入組織內而制成蠟塊。其優點是可以保存組織內可溶性物質,防止蛋白質變性和酶失活。
基本過程:新鮮組織在液氮中速凍后,真空抽氣,以排除組織內的水分,然后將充分干燥的組織用甲醛蒸氣固定,再將固定過的組織浸入石蠟內浸蠟,zui后石蠟包埋。此法包埋的蠟塊可用于免疫熒光和免疫酶標記,也可用于放射自顯影及IGSS方法。http://www.dgxuda.com/Login/default?Stand_DownLoadOperate
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