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小鼠胰島素自身抗體 IAAELISA試劑盒

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更新時間:2021-12-28 17:07:42瀏覽次數:711次

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使用說明書elisa法測定
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本試劑盒僅供體外研究使用!
ELISA法定量測定人尿液或其它相關生物液體中小鼠胰島素自身抗體 IAAELISA試劑盒含量。

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操作步驟 實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r,均需混勻,混勻時盡量避免起小鼠胰島素自身抗體 IAAELISA試劑盒 檢測范圍。 

加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液00μl,余孔分別加標準品或待測樣品00μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應20分鐘。 

為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 

2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加標記抗體工作液 00μl(取μl標記抗體加99μl標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制),37℃,60分鐘。 

3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡-2分鐘,200μl/每孔,甩干。  

4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同標記抗體工作液) 00μl37℃60分鐘。 

5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡-2分鐘,200μl/每孔,甩干。 

6. 依序每孔加底物溶液90μl37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔顯色不明顯,即可終止)。 

7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。 

8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后5分鐘以內進行檢測。 

 

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