進口ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被魚雌二醇（E2）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的魚雌二醇（E2）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

魚雌二醇（E2）ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法

.血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心0分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

3.細胞上清液：3000轉離心0分鐘去除顆粒和聚合物。

4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心0分鐘取上清。

5.進口ELISA試劑盒保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品

.酶標儀（450nm）

2.高精度加樣器及槍頭：0.5-0uL、2-20uL、20-200uL、200-000uL

3.37℃恒溫箱

魚雌二醇（E2）ELISA檢測試劑盒操作注意事項

.試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶*溶解后再使用。

2.實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

3.標準品稀釋液即可視為陰性對照或者空白；預處理后的樣本無需稀釋，直接取0μL加樣即可。

4.嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

5.所有進口ELISA試劑盒液體組分使用前充分搖勻。