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中級(jí)會(huì)員 | 第14年

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elisa酶聯(lián)免疫試劑盒
ScienCell細(xì)胞
標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品
生化試劑
蛋白/抗體
免疫組化檢測(cè)試劑盒
Western Blot
擔(dān)體
食品檢測(cè)試劑盒
澳大利亞無(wú)菌血清
熒光定量PCR試劑/試劑盒
sigma/amersco進(jìn)口試劑
HPLC檢測(cè)/生化試劑盒
PCR檢測(cè)試劑盒
原代細(xì)胞
抑制劑

小鼠(Mouse)(HYD) ELISA檢測(cè)試劑盒

時(shí)間:2016-11-1閱讀:486
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小鼠(Mouse)(HYD) ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟:

   使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
   根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
   加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。
   甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
   每孔加入00ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
   甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
   每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鐘。避免光照。
   取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。

   在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

小鼠(Mouse)(HYD) ELISA檢測(cè)試劑盒結(jié) 果 判 斷 與 分 析:

  儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
  以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的HYD標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的HYD含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

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