國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒的成果斷定分為定性和定量?jī)煞N ,在間接法和夾心法ELSIA中,陽(yáng)性孔呈色深于陰性孔。在競(jìng)賽法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽(yáng)性孔。那么兩類(lèi)成果怎么判別呢?為您解析:
()間接法和夾心法
這類(lèi)反響的定性成果能夠用肉眼判別。目視標(biāo)本也無(wú)色或近于無(wú)色者判為陰性,顯色明晰者為陽(yáng)性。但在ELSIA中,正常人血清反響后常可呈現(xiàn)呈色的本底,此本底的深淺因試劑的構(gòu)成和試驗(yàn)的條件不一樣而異,因而試驗(yàn)中有必要加測(cè)陰性對(duì)照。陰性對(duì)照的構(gòu)成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類(lèi)似物。在用肉眼判別成果時(shí),更宜用顯色深于陰性對(duì)照作為標(biāo)本陽(yáng)性的指標(biāo)。
目視法簡(jiǎn)捷明了,但頗具主觀性。在條件許可下,應(yīng)該用比色計(jì)測(cè)定吸光值,這樣能夠得到客觀的數(shù)據(jù)。先讀出標(biāo)本(sample,S)、陽(yáng)性對(duì)照(P)、和陰性對(duì)照(N)的吸光值,然后進(jìn)行核算。核算方法有多種,大致可分為陽(yáng)性斷定值法和標(biāo)本與陰性對(duì)照比值法兩類(lèi)。
a.陽(yáng)性斷定值
陽(yáng)性斷定值(cut-off value)通常為陰性對(duì)照A值加上一個(gè)特定的常數(shù),以此作為判別成果陽(yáng)性或陰性的規(guī)范。
用此法判別成果請(qǐng)求試驗(yàn)條件非常穩(wěn)定,試劑的制備有必要規(guī)范化,陽(yáng)性和陰性的對(duì)照品應(yīng)契合必定的規(guī)范,須配用精細(xì)的儀器,并嚴(yán)厲按規(guī)則操作。陽(yáng)性斷定值公式中的常數(shù)是在這特定的體系中經(jīng)過(guò)對(duì)很多標(biāo)本的試驗(yàn)檢查而得到的。現(xiàn)舉某種檢查HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對(duì)照品為不含HBsAg的復(fù)鈣人血漿,陽(yáng)性對(duì)照品HBsAg的含量標(biāo)明為P=9±2ng/ml。每次試驗(yàn)設(shè)2個(gè)陽(yáng)性對(duì)照和3個(gè)陰性對(duì)照。測(cè)得A值后,先核算陰性對(duì)照A值的平均數(shù)(NCX)和陽(yáng)性對(duì)照A值的平均數(shù)(PCX),兩個(gè)平均數(shù)的差(P-N)有必要大于一個(gè)特定的數(shù)值(例0.400),試驗(yàn)才有用。3個(gè)陰性對(duì)照A值均應(yīng)≥0.5×NCX,并≤.5×NCX,如其中之一超出此規(guī)模,則棄去,而已另兩個(gè)陰性對(duì)照從頭核算NCX;如有兩個(gè)陰性對(duì)照A值超出以上規(guī)模,則該次試驗(yàn)無(wú)效。陽(yáng)性斷定值按下式核算:陽(yáng)性斷定值=NCX+0.05,標(biāo)本A值>陽(yáng)性斷定值的為陽(yáng)性,小于陽(yáng)性斷定值的為陰性。應(yīng)留意的是,式中0.05為該試劑盒的常數(shù),只適合于該特定條件下,而不是對(duì)各種試劑均可通用。
依據(jù)以上敘說(shuō)能夠看出,國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒在這種方法中陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照也起到試驗(yàn)的質(zhì)控效果,試劑變質(zhì)和操作不妥均會(huì)發(fā)生"試驗(yàn)無(wú)效"的成果。
22373-78-0 Monensin Sodium 莫能菌素鈉鹽標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
03-6-2 Monobenzone 莫諾苯宗標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
86826-86-8 Moxifloxacin Hydrochloride 鹽酸莫西沙星標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
5074-43-6 Mupirocin Calcium 鈣標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
28794-94-5 Mycophenolate Mofetil 標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
544-63-8 Myristic Acid 肉豆蔻酸標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
42924-53-8 Nabumetone 標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
3-48-6 N-Acetylneuraminic Acid N-乙酰神經(jīng)氨酸標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
42200-33-9 Nadolol 康格爾標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
777-50-6 Nafcillin Sodium 萘夫西林鈉標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
65473-4-5 Naftifine Hydrochloride 鹽酸萘替芬標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒