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南京森貝伽生物科技有限公司

關(guān)于ELISA試劑盒的售前部分問題

時間:2018-2-2閱讀:234
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A:樣本類:組織,血清,血漿,細(xì)胞,唾液,腹腔液,糞便,腦髓液,尿液,灌洗液。                                                              B:關(guān)于細(xì)胞樣本:a:關(guān)于細(xì)胞裂解方式:加RAPA細(xì)胞裂解液(其中加多少量,根據(jù)裂解液說明書參考,一般濃度越大,加的量越少),蛋白酶抑制劑:穩(wěn)定蛋白的作用。                                                            b:從收集*個樣本開始到zui后一個樣本結(jié)束,到做實(shí)驗(yàn),樣本在一個禮拜之內(nèi)是保存在2-8℃,一個禮拜至一個月保存在-20℃,超過一個月-80℃(樣本的保存問題適用于所有樣本)                                                 c:技術(shù)做過破壞性驗(yàn)證:樣本保存在2-8℃做出來的結(jié)果會更好,凍存住樣本損失特別大。                                                            B:關(guān)于血漿,血清 a:血清和血漿的區(qū)別在于多了一個纖維蛋白原。                       b;血漿加抗凝劑離心,抗凝劑對實(shí)驗(yàn)無影響。                               c;血清有兩種收集兩種方法:①:加促凝劑,離心。②:自然凝固(不能低于兩個小時),離心。                                                        C:組織                                                               a;組織樣本收集三原則:①:組織樣本保持鮮重(不能用甲醛固定),②:重量不能低于50mg.③:勻漿的比例選取10%(當(dāng)樣本勻漿比例大,20%,30%勻漿會不充分。當(dāng)樣本濃度低時,可能會低于ELISA試劑盒檢測的下限值。)                         b;PBS:0.01mol,PH在4000r/min,不能超過5000r,蛋白在高速環(huán)境下易降解。                                                 D:唾液:兩種收集方法,一種是虹吸管直接收集,另外一種是用鑷子夾棉球蘸取。                                            E:糞便樣本:性質(zhì)狀態(tài)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果有很大影響。                             F:尿液:1:1(磷酸鹽緩沖液)的比例保存。                                  G:關(guān)于種類的區(qū)分:例如斑馬魚和草魚,都可以用魚的指標(biāo)(利用同源性相關(guān))                                            H:關(guān)于氣體:NO,乙烯,乙炔。用ELISA試劑盒檢測原理:氣體分子會與機(jī)體結(jié)合蛋白,有蛋白就可以測。                                               I:定量:直接測定樣本的陰陽性(一般都是病毒類)  定量:測定樣本的OD值。                                             活性;一般是檢測酶活:含量和活性成正比關(guān)系。                             J:雙抗夾心法:操作簡單,靈敏性差。    間接法:試劑盒靈敏度高,操作繁瑣。(一般RD的試劑盒,都是用間接法,RD一般做細(xì)胞因子。)                                        K: 批間值:不能超過15%,批類值:不能超過10%。進(jìn)口試劑盒批間批類差小,重復(fù)性好。進(jìn)口國產(chǎn)試劑盒都符合國家規(guī)定。                                                       L:試劑盒做平行,可以驗(yàn)證試劑盒重復(fù)性好,有效的測定有效值的取舍,三平行做出的數(shù)值標(biāo)準(zhǔn)差大于二平行。                                          M:出現(xiàn)邊緣效應(yīng):出現(xiàn)假陰假陽,酶標(biāo)板在經(jīng)過酶標(biāo)儀會進(jìn)行光的發(fā)散所引起的。

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