使用 D3 ES細(xì)胞。這是一個(gè)對(duì)于胎牛血清中生長(zhǎng)促進(jìn)、生長(zhǎng)抑制和分化因子非常敏感的細(xì)胞系。如何評(píng)估呢？我們通過(guò)以下幾個(gè)方面來(lái)具體分析

相關(guān)生長(zhǎng)效率分析：

     當(dāng) ES細(xì)胞以非常低的密度傳入包含10％胎牛血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基中，檢測(cè)開(kāi)始和支持ES細(xì)胞克隆的能力。 

    細(xì)胞毒分析：

     當(dāng)以非常低的密度傳入包含 30％胎牛血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基中，檢測(cè) ES細(xì)胞和 feeder 細(xì)胞的生長(zhǎng)能力。

    相關(guān)形態(tài)學(xué)和分化分析：

    檢測(cè)胎牛血清支持未分化 ES 細(xì)胞克隆的能力。通過(guò)堿性磷酸酶活性評(píng)估分化程度。未分化的 ES 細(xì)胞小顏色深紅粉紅，分化的細(xì)胞較大，豐滿， 顏色較淺。

    所有的分析在沒(méi)有 ESGRO 的情況下進(jìn)行的，培養(yǎng)基中出現(xiàn) ESGRO 會(huì)掩蓋由胎牛血清所導(dǎo)致的問(wèn)題。（ESGRO 或 LIF 經(jīng)常用來(lái)保持 ES 細(xì)胞處于 未分化狀態(tài)。）

    經(jīng)過(guò)培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，大約 8 批中有 1 批可以用來(lái)培養(yǎng) ES 細(xì)胞。