阿利新藍 PAS 染色液說明書
阿利新藍 PAS 染色液【原理及作用】
阿利新藍和 PAS 技術聯合使用可鑒別同一組織切片中的中性黏蛋白和酸性黏蛋白。這種 技術也常用作廣泛檢測黏蛋白的手段。該技術染色陰性,可明確斷定該物質不是黏蛋白。
在大多數方法中,切片先經標準的阿利新藍(pH 值為 2.5)染色,再使用 PAS 技術,阿利 新藍可將唾液黏蛋白、硫黏蛋白和蛋白多糖染成藍色。PAS 技術可將中性黏蛋白染成深紅/ 紅紫色,同時將既含中性黏蛋白又含酸性黏蛋白的組織和細胞染成深淺不同的紫色,這是由 于阿利新藍與 Schiff 試劑結合并反應。上述染色常可出現在含有中性黏蛋白和唾液黏蛋白 的小腸杯狀細胞中。
阿利新藍 PAS 染色液【參考操作步驟】
1、二甲苯脫蠟,梯度酒精入至去離子水再水化。
2、試劑(A)染 30min。
3、流水沖洗 5 min,去離子水快速沖洗。
4、試劑(B)氧化染 5min。
5、流水沖洗 5 min。
6、試劑(C)15min。
7、流水沖洗 10min。
8、試劑(D)淡染細胞核。
9、流水沖洗 5-10min,適當返藍。
10、流水沖洗 5min。
11、梯度酒精脫水,二甲苯透明,混合封片劑封片。
【結果】
糖原、中性黏蛋白、各種糖蛋白紅紫色 酸性黏蛋白(硫黏蛋白和唾液黏蛋白)藍色 蛋白多糖和透明質酸藍色
含有中性黏蛋白和酸性黏蛋白的細胞或組織可染成不同程度的藍紫色至紫色。
【貯存條件】 4℃,避光,密閉,12 個月
【注意事項】
1、蘇木素淡染非常重要,目的是防止胞漿或黏蛋白著色而掩蓋阿利新藍的顏色。
2、研究表明,阿利新藍-PAS 聯合技術的染色順序可影響zui終結果。 PAS 技術在阿利新 藍染色之前時,中性黏蛋白和糖原可染成紫色。與此相反,阿利新藍染色在 PAS 技術之前時, 則可將這些物質染成預期的紅紫色。PAS 染色后,中性碳水化合物獲得親阿利新藍能力的原 因不明。然而,有人認為,過碘酸氧化后形成的醛基可能與 Schiff 試劑中的亞硫酸鹽反應 形成一個陰離子,再與隨后的阿利新藍結合。
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