在細(xì)菌鑒定中，糖類發(fā)酵產(chǎn)酸是1項(xiàng)重要依據(jù)。細(xì)菌對(duì)糖類的利用有2種類型：1種是從糖類發(fā)酵產(chǎn)酸，不需要以分子氧作為zui終受氫體，稱發(fā)酵型產(chǎn)酸；另一種則以分子氧作為zui終受氫體，稱氧化型產(chǎn)酸。前者包括的菌種類型為多數(shù)。氧化型產(chǎn)酸量較少，所產(chǎn)生的酸常常被培養(yǎng)基中的蛋白胨分解時(shí)所產(chǎn)生的胺所中和，而不表現(xiàn)產(chǎn)酸。為此，Hugh和Leifson提出一種含有低有機(jī)氮的培養(yǎng)基，用以鑒定細(xì)菌從糖類產(chǎn)酸是屬氧化型產(chǎn)酸或發(fā)酵型產(chǎn)酸。這一試驗(yàn)廣泛用于細(xì)菌鑒定。一般用葡萄糖作為糖類代表。也可利用這一基礎(chǔ)培養(yǎng)基來(lái)測(cè)定細(xì)菌從其他糖類或醇類產(chǎn)酸的能力。
（1）接種 ：以18－24h的幼齡菌種，穿刺接種在上述培養(yǎng)基中，每株菌接4管，其中2管用油封蓋（凡士林：液體石蠟＝1：1混合后滅菌），約加0.5－1厘米厚，以隔絕空氣為閉管。另2管不封油為開(kāi)管，同時(shí)還要有不接種的閉管作對(duì)照。適溫培養(yǎng)1、2、4、7天觀察結(jié)果。
（2）結(jié)果觀察：氧化型產(chǎn)酸――僅開(kāi)管產(chǎn)酸，氧化作用弱的菌株往往先在上部產(chǎn)堿（1－2d），后來(lái)才稍變酸。發(fā)酵型產(chǎn)酸則開(kāi)管及閉管均產(chǎn)酸，如產(chǎn)氣，則在瓊脂柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡。