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青島捷世康生物有限公司
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閱讀：361發布時間：2018-11-7
土壤多酚氧化酶（Solid-Polyphenol oxidase，S-PPO）試劑盒說明書
分光光度法 50 管/48 樣
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：
S-PPO 主要來源于土壤微生物、植物根系分泌物及動植物殘體分解釋放，催化土壤中芳香族
化合物氧化成醌，醌與土壤中蛋白質、氨基酸、糖類、礦物等物質反應生成有機質和色素，
完成土壤芳香族化合物循環，用于土壤環境修復。
測定原理：
S-PPO 能夠催化鄰苯三酚產生有色物質，后者在430nm 有特征光吸收。
自備用品：
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿、乙醚100mL（不
允許快遞）、蒸餾水。
試劑組成和配制
試劑一：粉劑×2 瓶，4℃保存；臨用前取一瓶加入15mL 蒸餾水，用不完的試劑4℃保存一周；
試劑二：液體12mL×1 瓶，4℃保存；
試劑三：乙醚50mL×2 瓶，4℃保存；（自備）
樣品處理
新鮮土樣自然風干或37 度烘箱風干，過30~50 目篩。
測定步驟
試劑名稱 測定管
風干土樣（g） 0.05
試劑一（μL） 500
振蕩混勻，30℃恒溫培養1 h
試劑二（μL） 200
試劑三（μL） 1750
振蕩數次，室溫靜置30min，用蒸餾水調零，取1mL 上層液于430nm 處測定吸光值A。
（注意：1、因乙醚粘度小，易掉液，吸取前需先將槍頭在上層液里潤洗 2~3 次，再轉移測
定；2、乙醚易揮發，轉移到 96 孔板后立即測定，一個一個測定）。
S-PPO 活力計算
標準條件下測定的回歸方程為y = 8.97x -0.003；x 為標準品濃度（mg/mL），y 為吸光值A。
單位的定義：每天每g 土樣中產生1mg 紫色沒食子素定義為一個酶活力單位。
S-PPO 活力（mg/d /g 土樣）＝(A+0.003) ÷8.97×V 反總÷W÷T=131×(A+0.003)
T：反應時間，1h=1/24d； V 反總：反應體系總體積2.45mL；W：樣本質量，0.05g。
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