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上海邦景實業(yè)有限公司
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豬c-fos elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作流程
2019-11-22 閱讀(338)
十一月來了，看著它真年輕，年輕得讓我有些恍惚，恍惚著想起了過去，想起了你。不知此時，可有人為你燃燈守望，可有人陪你圍爐取暖，可有人與你歲歲年年。接下來介紹豬c-fos elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作流程
操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標準品組（6 個濃度）、空白孔、待測樣品組。
注：為減少實驗誤差，保證準確性，建議設(shè)置復孔。
3. 加樣：依照標準品的順序分別加入 100ul 的標準品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入 100ul 的蒸餾水；其余微孔中加入100ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液：標準品組、待測樣本組各孔中加入 50ul 的酶標溶液（空白對照孔除外）。
5. 溫育：酶標板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標板 5 次，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。
9. 讀板：在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
注意事項：
1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2． 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3． 各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物請避光保存。
7． 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
