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人胚腎細胞雙抗夾心法具體實驗步驟

2018-3-26  閱讀(263)

人胚腎細胞雙抗夾心法具體實驗步驟
首先*步是包被,用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。第二天,丟棄孔中的溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次洗滌3分鐘。
第二步是加樣,加一定稀釋的待檢樣品0.1ml到已包被的反應孔中,置于37℃ 的溫度下孵育1小時。孵育完之后洗滌。
洗滌完之后需要做的是加酶標抗體在各個反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。
做完上個步驟,下面我們需要做的就是加底物液顯色,在各個反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
實驗即將完成即終止反應,于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
實驗的zui后一步即實驗結果的判定,可在白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
人胚腎細胞HAmEpiCL    人羊膜上皮細胞裂解物    200 µg
HVTL    人滋養層絨毛細胞裂解物    200 µg
HVMFL    人絨毛間葉成纖維細胞裂解物    200 µg
HPA-v L    人前脂肪細胞-內臟裂解物    200 µg
HPA-s L    人前脂肪細胞-皮下裂解物    200 µg
HMSC-bm L    人間充質干細胞-骨髓裂解物    200 µg
HMSC-ad L    人間充質干細胞-脂肪裂解物    200 µg
HMSC-hp L    人間充質干細胞-肝臟裂解物    200 µg
HUMSCL    人臍帶間充質干細胞裂解物    200 µg
HPMSCL    人肺間充質干細胞裂解物    200 µg
HMEpiCL    人乳腺上皮細胞裂解物    200 µg
HMFL    人乳腺成纖維細胞裂解物    200 µg
HUVECL    人臍靜脈內皮細胞裂解物    200 µg
HUAECL    人臍動脈內皮細胞裂解物    200 µg
HUVSMCL    人臍靜脈平滑肌細胞裂解物    200 µg
HUASMCL    人臍動脈平滑肌細胞裂解物    200 µg
HBMEC cDNA    人腦微血管內皮細胞cDNA    20 reactions
HBVSMC cDNA    人腦血管平滑肌細胞cDNA    20 reactions
HBVP cDNA    人腦血管周細胞cDNA    20 reactions
HCPEC cDNA    人脈絡叢內皮細胞cDNA    20 reactions
HCPEpiC cDNA    人脈絡叢上皮細胞cDNA    20 reactions
HCPF cDNA    人脈絡叢成纖維細胞cDNA    20 reactions
HMC cDNA    人腦膜細胞cDNA    20 reactions
HN cDNA    人神經元cDNA    20 reactions
HCGC cDNA    人小腦顆粒細胞cDNA    20 reactions
HN-h cDNA    人海馬趾神經細胞cDNA    20 reactions
HOPC cDNA    人少突膠質前體細胞cDNA    20 reactions
HOPC-os cDNA    人少突膠質前體細胞(懸浮生長)cDNA    20 reactions
HSC cDNA    人雪旺細胞cDNA    20 reactions
HPC cDNA    人神經束膜細胞cDNA    20 reactions
HA cDNA    人星形膠質細胞cDNA    20 reactions
HA-c cDNA    人小腦星形膠質細胞cDNA    20 reactions
HA-sp cDNA    人脊髓星形膠質細胞cDNA    20 reactions
HA-h cDNA    人海馬趾星形膠質細胞cDNA    20 reactions
HM cDNA    人小膠質細胞cDNA    20 reactions
HDMEC cDNA    人微血管內皮細胞cDNA    20 reactions
HDLEC cDNA    人血管平滑肌細胞cDNA    20 reactions
HEK cDNA    人表皮角質細胞cDNA    20 reactions
HEK-a  cDNA    人表皮角質細胞-成人cDNA    20 reactions
HEM-l cDNA    人表皮黑色素細胞-淺色素cDNA    20 reactions
HEM-m cDNA    人表皮黑色素細胞-中色素cDNA    20 reactions
HEM-d cDNA    人表皮黑色素細胞-深色素cDNA    20 reactions人胚腎細胞

 

 



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