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植物病原菌分離實(shí)驗(yàn)步驟

2025-3-3  閱讀(57)

植物病原菌分離實(shí)驗(yàn)步驟
1.工作環(huán)境的清潔和消毒
分離培養(yǎng)一般在無(wú)菌室、無(wú)菌箱或無(wú)菌工作臺(tái)(超凈工作臺(tái))上進(jìn)行,無(wú)菌室和無(wú)菌箱要經(jīng)過(guò)噴霧除塵,并用藥物或紫外線照射消毒(常用消du藥物為70%酒精,2%煤酚皂液,5%石tan酸液等噴霧。若用紫外線燈照射則需20-30分鐘)。在沒(méi)有上述設(shè)備條件時(shí),在清潔房間里關(guān)閉門窗,避免空氣流動(dòng),經(jīng)過(guò)噴霧除去空氣及地面灰塵后進(jìn)行操作,也可獲得較好的結(jié)果。工作前擦凈桌面,最好鋪上濕紗布。將所需用的物品按次序放在工作臺(tái)上,避免工作時(shí)走動(dòng),工作人員最好穿上滅菌后的工作服,帶上口罩,并用肥皂洗手,用70%酒精或0.1%新潔爾滅擦手。

2.分離用具的消毒
凡是和分離材料接觸的器皿(刀、剪、鑷、針等)都要隨時(shí)(至少在使用時(shí))保持無(wú)菌,將這些用具浸于70%酒精中,使用時(shí)在燈焰上滅菌燒去酒精,如此2-3次(刀、剪、鑷等不宜在燈焰上燒時(shí)過(guò)長(zhǎng),以防退火)。再次使用時(shí)必須重復(fù)滅菌。培養(yǎng)皿、試驗(yàn)等要經(jīng)過(guò)干熱滅菌。培養(yǎng)基及洗滌或稀釋用蒸餾水都需要事先經(jīng)過(guò)高壓蒸氣滅菌。

3.分離材料的選擇
用新發(fā)病的植株、器官或組織做為分離材料,可以減少腐生菌的污染。任何植物壞死部分的內(nèi)部或表面,都可能有腐生微生物的孽生,所以一般斑點(diǎn)病害應(yīng)從鄰近健全組織,即從病、健組織交界處獲得分離材料。



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