此為簡要說明書
促甲狀腺素（TSH）測定試劑盒（酶聯(lián)免疫法）說明書
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱：促甲狀腺素（TSH）測定試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名稱：Detection Kit for thyroid-stimulating hormone（TSH）（Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA）
【包裝規(guī)格】96人份/盒，48人份/盒
【預期用途】
用于體外定量測定人血清中促甲狀腺素（TSH）的含量。
TSH是診斷甲狀腺功能和研究下丘腦-垂體-甲狀腺軸的重要指標之一，尤其對先天性甲低有重要意義。在甲狀腺功能評估中，可鑒別原發(fā)性和繼發(fā)性（垂體和下丘腦性）甲狀腺功能低下癥。并可作為對甲低癥療效觀察指標。此外，可觀察垂體TSH的儲備功能，進一步區(qū)別下丘腦和垂體的病變[1]。
【檢驗原理】
采用酶聯(lián)免疫分析方法。采用兩株單克隆抗體，一株用于固相包被制備固相抗體，另一株用于HRP的標記制備HRP-抗體。在包被抗體的微孔中加入TSH（標準或待測樣品）及HRP-抗體，平衡后形成“固相抗體-抗原-HRP-抗體”的復合物。經(jīng)加底物顯色后，隨著TSH濃度的升高，顯色A值（或稱吸光度、OD值）呈逐漸上升的線性關系。
【主要組成成分】
表1 試劑盒主要組成成分
規(guī)格 組分 | 數(shù)量 | 體積 | 制品狀態(tài) | 主要成分 |
96T | 48T | 96T | 48T |
1）TSH校準品（S1~S6） | 6瓶 | 0.5ml | 0.5ml | 液 體 | TSH(0.3、0.6、1.5、3.0、6.0、12.0mIU/L)，0.02M磷酸鹽緩沖液，2%牛血清白蛋白（BSA），0.1% Proclin-300 |
2）酶標抗體 | 1瓶 | 6ml | 3ml | 液 體 | 酶標-抗-TSH（單抗），0.02M磷酸鹽緩沖液，20%新生牛血清，0.1%Proclin-300，0.01%食品紅 |
3）質(zhì)控品 | 2個水平各一支 | 1ml | 1ml | 液 體 | TSH，*正人血清，0.1% Proclin-300 |
4）顯色劑A | 1瓶 | 7ml | 3.5ml | 液 體 | 11mmol/L 過氧化脲素 |
5）顯色劑B | 1瓶 | 7ml | 3.5ml | 液 體 | 2mmol/L 3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺 |
6）終止液 | 1瓶 | 7ml | 3.5ml | 液 體 | 2mol/L硫酸 |
7）濃縮洗滌液（20×） | 1瓶 | 15ml | 15ml | 液 體 | 0.2M 磷酸鹽緩沖液，含0.5%的吐溫-20 |
8）預包被板 | 1塊 | 96孔 | 48孔 | —— | 抗-TSH單克隆抗體，聚苯乙烯微孔板 |
9）封板膜 | 2張 | ———— |
10）封口袋 | 1個 | ———— |
注：校準品可溯源至中國食品藥品檢定研究院國家標準品（編號：150530）。
【儲存條件及有效期】
2~8℃儲存，有效期為12個月。
【適用儀器】
適用于各種類型的洗板機、半自動酶免分析儀。
【樣本要求】
取血樣后分離血清，2~8℃保存不超過48小時，*保存可凍存于-15℃以下。
【檢驗方法】
- 將各種試劑移至室溫平衡半小時，取濃縮洗滌液，根據(jù)當批檢測數(shù)量，用蒸餾水1：20稀釋，混勻后備用。
- 將預包被板從密封袋中取出，設一個空白對照孔，不加任何液體；每個校準點依次各設兩孔，每孔加入相應校準品100μl；其余每個檢測孔直接加質(zhì)控品或待測血清100μl。然后各孔加入酶標抗體50μl，充分混勻，貼上封板膜，置37℃溫育2小時。
- 手工洗板：棄去孔內(nèi)液體，洗滌液注滿各孔，靜置10秒甩干，重復3次后拍干。洗板機洗板：選擇洗滌3次程序洗板后拍干。
- 每孔加顯色劑A液50μl，顯色劑B液50μl，振蕩混勻后，置37℃避光顯色15分鐘，每孔加終止液50μl。
- 用酶標儀讀數(shù)，單波長酶標儀需先用空白對照孔調(diào)零點，然后測定各孔吸光值。
【參考區(qū)間】
正常參考區(qū)間：0.5~5.0mIU/L。
通過測定200份正常人血清，經(jīng)統(tǒng)計學處理（正態(tài)分布，取95%置信區(qū)間）確定參考區(qū)間。
由于人的個體差異及地域、年齡和性別的不同，所確定的參考區(qū)間存在一定差異，因此本說明書所提供的參考區(qū)間僅作參考，各實驗室應根據(jù)各自地區(qū)的正常人群建立自己的參考區(qū)間。
【檢驗結(jié)果的解釋】
- 雙波長酶標儀可以不設空白對照孔，也無需調(diào)零點。單波長酶標儀必須設空白對照孔，先用空白對照孔調(diào)零，然后測量。
- 作圖法：以校準品S1~S6的吸光值為縱軸（log對數(shù)坐標），相應濃度為橫軸(log對數(shù)坐標),在對數(shù)坐標紙上繪制校準品曲線,在校準品曲線上查出待測標本的含量。
- 計算機：由電腦計算出其濃度。
【檢驗方法的局限性】
1.嚴重溶血、乳糜血可能會影響檢測結(jié)果。
2.本產(chǎn)品能夠檢測濃度達到120mIU/L的樣本仍無倒勾現(xiàn)象，不會因為倒勾現(xiàn)象出現(xiàn)假陰性。
【產(chǎn)品性能指標】
- 外觀和物理檢查：試劑盒應組分齊全，內(nèi)外包裝均應完整，標簽清晰，液體試劑無滲漏。各組分裝量不少于表1中要求。
- 準確性：試劑盒內(nèi)校準品與相應濃度的國家標準品同時進行分析測定，用雙對數(shù)（Log-Log）數(shù)學模型擬合，要求兩條劑量-反應曲線不顯著偏離平行（t檢驗）；以TSH國家標準品為對照品，試劑盒內(nèi)校準品的實測效價與標示值效價的比應在0.900~1.100之間。
- 劑量-反應曲線的線性：用Log-Log數(shù)學模型擬合，在0.3~50mIU/L范圍內(nèi)，劑量-反應曲線相關系數(shù)（r）的值應不低于0.9900。
- 精密度
4.1分析內(nèi)精密度：試劑盒質(zhì)控品測定結(jié)果的變異系數(shù)（CV）應不大于15.0%。
4.2分析間精密度：在多次獨立分析之間，質(zhì)控品測定結(jié)果的變異系數(shù)（CV）應不大于20.0%。
4.3批間精密度：在多個不同批次產(chǎn)品之間，質(zhì)控品測定結(jié)果的變異系數(shù)（CV）應不大于20.0%。
- zui低檢出限：應不高于0.10mIU/L。
- 質(zhì)控品測定值：每次檢測結(jié)果均應在允許范圍內(nèi)。
- 特異性
7.1檢測濃度為200IU/L的促卵泡生成素（FSH）結(jié)果不高于0.10mIU/L。
7.2檢測濃度為200IU/L的促黃體生產(chǎn)素（LH）結(jié)果不高于0.10mIU/L。
7.3檢測濃度為1000IU/L的人絨毛膜*（hCG）結(jié)果不高于0.10mIU/L。
【注意事項】
- 本品僅供體外實驗。
- 雙波長儀器可以不設空白孔，也無須調(diào)零。
- 做實驗前必須將試劑盒恢復至室溫，加試劑前應先搖勻，加樣中應避免交叉污染。
- 溫育反應過程中必須貼封板膜。
- 不同批號試劑不能混用。
- 試劑中含有牛源類成分，保證來自于非瘋牛病疫情國家或地區(qū)，加之本產(chǎn)品不直接用于人體，產(chǎn)品在運輸、使用過程中對接觸者和環(huán)境沒有安全隱患。但是建議客戶仍視為有潛在風險。
【標識的解釋】
儲存條件2~8℃
