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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)檢測(cè)準(zhǔn)確度分析

閱讀:494發(fā)布時(shí)間:2017-11-20

  ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、ELISA檢測(cè)試劑盒寄生蟲(chóng)病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA試劑盒法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。

  因此,可通過(guò)底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定有無(wú)相應(yīng)的免疫反應(yīng),顏色反應(yīng)的深淺與標(biāo)本中相應(yīng)抗體或抗原的量呈正比。如果您一直被所困擾,那么也許您該花些時(shí)間來(lái)優(yōu)化封閉液。這可能需要時(shí)間,但也是值得的。

  目前主要有兩種類型的封閉液:蛋白和非離子型去污劑。您使用的類型須取決于多個(gè)因素,包括微孔板的表面ELISA檢測(cè)試劑盒、吸附的抗原、您的抗體和檢測(cè)試劑。好的封閉液應(yīng)降低非特異性結(jié)合,但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測(cè)試劑發(fā)生相互作用。

  ELISA試劑盒此種酶標(biāo)記抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合。滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氫體由無(wú)色的還原型變成有色的氧化型,ELISA檢測(cè)試劑盒出現(xiàn)顏色反應(yīng)。

  zui常用的非離子型去污劑是Tween-20。這種封閉液便宜、穩(wěn)定,在去除洗滌過(guò)程中的一些非特異結(jié)合上很有用。

在這種測(cè)定方法中有三個(gè)必要的試劑:

1固相的抗原或抗體,即"免疫吸劑"(immunosorbent);

(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體,稱為“酶聯(lián)物"、“結(jié)合物"(conjugate);

(3)酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的情況以及檢測(cè)的具體條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。


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