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上海莼試生物技術(shù)有限公司

人β2-微球蛋白(β2-MG)elisa試劑盒的顯色比色技術(shù)參數(shù)

時間:2019-3-13閱讀:315
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人β2-微球蛋白(β2-MG)elisa試劑盒的顯色比色技術(shù)

顯色

顯色是ELISA試驗(yàn)中zui后一步溫育反應(yīng),此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時間仍是影響顯色的因素。適當(dāng)提高溫度,有助于加速顯色。在一定時間內(nèi),陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強(qiáng)。在定量檢測中,加入底物后的反應(yīng)溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。ELISA顯色結(jié)果通過酶標(biāo)儀進(jìn)行,可減少實(shí)驗(yàn)誤差,提高臨界值樣本的分析準(zhǔn)確度。盡量避免肉眼直接判斷結(jié)果,因?yàn)椴煌瑐€體的視覺存在差異。應(yīng)注意,加顯色劑時,要保持顯色劑不外流。加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生較多氣泡,否則可能使假陽性結(jié)果的出現(xiàn)概率增加。

比色

比色的方法有目視法和酶標(biāo)比色法2種。目視法簡單明了,但對同一標(biāo)本,操作者的不同有時會出現(xiàn)不同的結(jié)果,具有一定的主觀性。比色的結(jié)果通常用光密度表達(dá),現(xiàn)按規(guī)定用吸光度表達(dá)。酶標(biāo)儀不應(yīng)安置在陽光或強(qiáng)光照射下,操作時的適宜室溫在15℃~30℃之間,使用前要先預(yù)熱儀器15~30min,使測得結(jié)果更為準(zhǔn)確。比色前,應(yīng)先用潔凈的吸水紙擦拭干凈板底附著的液體,然后將板正確放在酶標(biāo)比色儀的比色架上。綜上所述,的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。在實(shí)際應(yīng)用過程中,操作者必須熟練掌握基本操作技能,對每個環(huán)節(jié)進(jìn)行嚴(yán)格仔細(xì)的核查,盡量避免假陽性和假陰性反應(yīng)的出現(xiàn),保證檢測結(jié)果真實(shí)可靠,為臨床診斷和疾病防治提供可靠的理論依據(jù)。

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