2011 09-08

生物圖像處理的基本術語和常用參數

一.像素與灰度1．像素是構成顯示器圖像的zui基本單元，按行和列（X和Y）方向排列成矩列。任何一矩列均對應一個點，這些點稱為像素。單位面積屏幕上像素愈多則圖像愈清晰，即分辨率愈高，顯示的圖像也越細膩和...

2011 09-05

原位雜交結合免疫組織化學技術

原位雜交結合免疫組織化學技術主要用于在同一細胞內同時或先后檢測特定基因在核酸和蛋白質或多肽水平的表達，這樣不僅能了解基因表達，而且還能研究某種基因表達的翻譯和轉錄調節。如果免疫組織化學檢測的抗原成分是...

2011 08-31

自動化的ELISA技術

在一般的概念里，ELISA技術的可操作性強，不需復雜設備，甚至*手工加樣、洗板和肉眼判讀結果，便可完成該技術的操作。隨著人們對質量控制意識的加強，盡可能做到zui低限度的減少系統誤差，以及減少勞動強度...

2011 08-29

125I標記物的鑒定方法

1．放射化學純度是指單位標記物中結合于被標記物上的放射性占總放射性的百分率，一般要求大于95%。常用的測定方法是利用三氯醋酸將待測樣品中（預加白蛋白助沉淀）所有蛋白質沉淀，離心后測定沉淀物（標記物）的...

2011 08-24

外源凝集素技術

外源凝集素（lectin）又稱植物凝集素、凝集素或選擇素，是廣泛存在于動植物細胞內的一種糖蛋白成分，是機體中除抗體和酶之外的第三類具有識別作用的蛋白質，它可與某一特定細菌發生特異性結合，從而對細菌具有...

2011 08-22

化學試劑的等級

根據化學試劑的純度，按雜質含量的多少可分為四級：一級試劑為純試劑，通常用G·R表示；二級試劑為分析純試劑，通常用A·R表示；三級試劑為化學純試劑，通常用C·R表示；四級試劑為實驗或工業試劑，通常用L·...

2011 08-17

Western Blot

【實驗原理】一個基因表達*結果是產生相應的蛋白質（或酶）。因此檢測蛋白質是測定基因表達的主要標志，檢測蛋白質的方法很多，除ELISA法外，也可用與檢測DNA和RNA相類似的吸印方法。前兩法有“南”和“...

2011 08-15

電子顯微鏡待檢樣品的制備

一、電子顯微鏡與光學顯微鏡的主要區別顯微鏡的分辨率取決于所用光的波長，1933年開始出現的電子顯微鏡正是由于使用了波長比可見光短得多的電子束作為光源，使其所能達到的分辨率較光學顯微鏡大大提高。而光源的...

2011 08-05

怎么獲得染料法熒光PCR的可靠數據

染料法熒光PCR的數據與探針法的相比，除了擴增曲線之外，還增加了熔解曲線分析。如何確定數據是好是壞？好的話，數據可以使用；壞的話，需要查明原因，擬定下一步的體系優化方案。這里探討如何確定數據是好是壞，...

2011 08-02

初步分析IHC實驗結果不好的原因

當拿到一種商品化抗體，或自己制備的一抗或贈送的一抗，一般可根據如下原則處理：①、尋找信息；②、如無任何信息，可先不經任何前處理用于IHC檢測；③、如未經處理的染色結果呈陰性或不理想陽性結果，可用酶消化...

2011 07-28

化學合成Oligo知識

Oligo在分子生物學研究、臨床診斷和藥物治療方面很重要，而對于實驗成功與否，選擇適當的方法純化Oligo其實是十分關鍵的。一、為什么要純化？Oligo有機化學原理是利用結合于固相載體（CPG）上的核...

2011 07-26

神經細胞培養實驗用的各種基質

培養細胞的*培養基由基礎培養基（如MEM）和添加劑（如血清或無血清培養用的某些確定的激素及生長因子）組成，培養基的配方一直在改進，其中包括抗生素和抗有絲分裂劑等等?；A培養基絕大多數培養基是建立在*（...

2011 07-22

限制性內切酶位點優勢效應

某些限制性內切酶對同一底物的不同位點切割效率不同，這種現象被稱為內切酶的位點優勢效應。1975年，Thomas和Davis（1）發現EcoRI并不是隨機切割λDNA分子上的5個識別位點，其中對λDNA...

2011 07-19

IHC實驗熱誘導的抗原修復的可能機制

抗原修復（antigenretrieval；AR）是否可能?理論研究上尚未清楚，但是以高溫、高壓對常規固定石蠟切片進行抗原修復處理的實踐表明，可以提高抗原—抗體陽性檢測率，同時也可能會出現假陽性，現已...

2011 07-12

RNA提取常見問題

1、RNA降解A、新鮮細胞：如果試劑沒有問題，且外源性污染也可以排除，那么降解幾乎都來自裂解液的用量不足。如果將裂解液直接加入培養皿中裂解細胞，一定要使裂解液能覆蓋住細胞。B、新鮮組織：某些富含內源核...

2011 07-04

抗體—微珠勻漿法

一種在抗體—微珠基質上快速捕獲抗原的方法是將抗原溶液與微珠混合，旋轉或振蕩制成勻漿。這種方法可使抗原和固相化的抗體之間zui大限度地接觸，是一種促使結合反應快速完成的方法。結合反應完成后，將勻漿裝入層...

2011 06-30

質粒提取純度不高的因素

A、蛋白質污染建議：選擇推薦量的菌體，離心后小心吸取上清，如果上清液中混有懸浮物，可再次離心，以*去除蛋白質。B、RNA污染建議：檢查配送的RNAseA是否*加入到BufferA1中，加入RNAseA...

2011 06-27

單克隆抗體細胞的選擇

（一）脾細胞1．材料（1）免疫過的血清抗體滴度高的Balb/c鼠。（2）1640培養液（3）2.5％FCS－1640營養液2．操作方法（1）拉頸或用CO2處死小白鼠。（2）將小鼠放于70％酒精中浸泡消...

2011 06-20

脂肪酸的β-氧化過程

一、脂肪酸的β-氧化過程肝和肌肉是進行脂肪酸氧化zui活躍的組織，其zui主要的氧化形式是β-氧化。此過程可分為活化，轉移，β-氧化共三個階段。1.脂肪酸的活化脂肪酸參加代謝前和葡萄糖一樣也先要活化...

2011 06-16

人們抗壓能力的蛋白的發現

們每天都要面對各種各樣的壓力，有的人精神狀態好，能坦然面對；有的人則惶惶不安，進而患上抑郁癥、焦慮癥等精神疾病。之前這種差異背后的病理機制尚不清楚，不過近日研究小組發表在《自然》雜志上的報告稱，人大腦...