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人粒細(xì)胞集落刺激因子elisa試劑盒實驗原理

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實驗原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)水平。用純化的人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF),再與HRP 標(biāo)記的粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)濃度。

試劑盒組成

1 30 倍濃縮洗滌液20ml×1 7 終止液6ml×1

2 酶標(biāo)試劑6ml×1 8 標(biāo)準(zhǔn)品(1200ng/L0.5ml×1

3 酶標(biāo)包被板12 孔×8 9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1

4 樣品稀釋液6ml×1 10 說明書1

5 顯色劑A 6ml×1 11 封板膜2

6 顯色劑B 6ml×1/12 密封袋1

標(biāo)本要求

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

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