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規格 | 5×105Cells/T25培養瓶 | 組織來源 | 皮膚組織 |
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貨號 | CS-X3404 | 細胞形態 | 梭形、多角形 |
產品信息:
貨號 | CS-X3404 | 組織來源 | 皮膚組織 |
傳代特性 | 可傳1-2代 | 培養基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
細胞形態 | 梭形、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
培養條件 | 換液頻率 | 每2-3天換液一次; |
商品介紹:
產品名稱:小鼠真皮毛乳頭細胞 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 小鼠真皮毛乳頭細胞分離自皮膚毛囊組織;毛囊是表皮細胞連續形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進的真皮毛乳頭,中心是一根毛發,立毛肌的一側斜附在毛囊壁上,附著點的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸,毛囊在皮膚表面的開口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下組織中,毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度,它是由包繞毛發與表皮相連的上皮鞘,以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個結構比較復雜的器官附件組織。毛囊實際上是由結締組織和上皮兩部分所組成,除了具有結締組織和血管的真皮乳頭(毛乳頭)外,毛囊其余部分都是由表皮細胞分化而來。真皮毛乳頭細胞位于毛囊基底部,是一類成纖維細胞。在毛囊發育早期,真皮細胞向單層上皮細胞發出第一真皮信號,刺激上皮局部形成毛基板。隨后毛基板細胞向下方的真皮發出第一表皮信號,誘導其形成有成纖維細胞組成的凝集細胞團。在此過程中,毛母質細胞逐漸包裹凝集細胞團,形成成熟的真皮毛乳頭細胞。作為毛囊中的重要細胞群,真皮毛乳頭細胞的分子機制和臨床應用正在被逐漸認識和解析。 5.方法簡介: 公司實驗室分離的小鼠真皮毛乳頭細胞采用膠原酶-中性dan白酶混合消化法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。 6.質量檢測: 公司實驗室分離的小鼠真皮毛乳頭細胞經層粘連蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 包被條件 PLL(0.1mg/ml) 培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次; 生長特性 貼壁 細胞形態 梭形、多角形 傳代特性 可傳1-2代 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細胞保存方法:
(一)細胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養液;
2. 取對數生長期的細胞,去除舊培養液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養皿表面)把單層生長的細胞消化下來;
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數,調節凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;
8. 凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內。
注意事項:
1)、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態,約為80~90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質,應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產生。
2)、細胞在液氮中可長期凍存無,而不會影響細胞活力;在-70度可保存數月。
3)、注意冷凍保護劑之品質。DMSO應為試劑級等級,無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級,以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲,可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
公司正在出售的產品:
95-D [PLA-801D] (人高轉移肺癌細胞) | 人補體片段3d(C3d)試劑盒ELISA |
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人臍動脈內皮細胞 | 牛乳頭瘤病毒PCR檢測試劑盒 |
人臍動脈平滑肌細胞 | 豬傳染性胃腸炎/豬流行性腹瀉病毒/豬A組輪狀病毒(TGEV/PEDV/PRV-A)核suan檢測試劑盒 |
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養基,使細胞處于指數生長期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養之細胞,用加血清的培養基重懸起細胞,取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數細胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細胞懸液,并晃動試管,制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后,注明細胞名稱、代數、日期。然后進行凍存。
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