蛋白A純化預裝柱細胞凋亡與增殖

商品屬性：

商品介紹：

本品Protein A 4FF Chromatography Column，1ml是一種裝填了Protein A Agarose Resin 4FF的中壓預裝柱，規格1ml，預裝柱具有標準接口，可以適配商品化的各類中壓色譜系統，如?KTA 等，方便客戶操作。

天然蛋白A（Protein A）是一種發現于葡萄球菌的細胞壁表面蛋白，與分離自G型或C型鏈球菌屬的蛋白G類似，主要通過與免疫球蛋白（Ig）的Fc區相互作用，結合大多數哺乳動物的IgG，可用于多種抗體（單抗和多抗）的分離純化。在與不用的免疫球蛋白亞類的結合特性上，ProteinA 和Protein G結合性能不太一樣（詳見附錄1）。

本品使用的是基因改造后的蛋白A，不僅維持其本身的Ig親和特性，同時也去除了天然蛋白本身的非主要結合域以降低非特異性結合，Protein A Agarose Resin 4FF以高度交聯的瓊脂糖凝膠為基質，重組Protein A為配基，具有很高的物理化學穩定性，可以在相對較高的流速下進行抗體的純化，適用于工業客戶。利用本品經過一步親和層析，即可從腹水、血清和培養液等樣品中得到高純度的抗體，使用方便，應用廣泛。

基質（Matrix）：高度交聯的4%瓊脂糖微球

配體（Ligand）：重組蛋白A

孔徑（Bead size）：45-165μm

大流速（Flowmax）：0.3MPa,3bar

儲存緩沖液：含20%乙醇的1×PBS

載量（Capacity）：＞40mg human IgG/ml 基質

pH范圍：3-12

儲存條件：4℃，有效期兩年

步驟和注意事項：?

準備實驗環境：?確保實驗區域清潔，?使用酒精清潔計數板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細胞培養：?

準備試管或培養皿、?細胞培養基和待培養的細胞。?

取出保存于低溫下的細胞苗，?并加入培養基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細胞培養基和細胞種植在試管或培養皿中。?

將試管或培養皿放置于恒溫培養箱中，?定期更換培養液。?

細胞凍存與復蘇：?

細胞系的凍存是將生長較好的傳代細胞懸浮在加有冷凍保護劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?

復蘇則是將凍存的細胞系恢復到常溫的過程，?原則是“慢凍快融"，?以較大限度地保存細胞活力。?

細胞計數：?

制備細胞懸液，?使用消化單層培養細胞或收集懸浮培養細胞，?制成單個細胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計數板四角大方格中的細胞數，?細胞壓中線時，?只計左側和上方者，?不計右側和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對細胞進行染色，?并觀察細胞所發出的熒光信號，?以研究細胞結構和功能。?

聚合酶鏈反應（?PCR）?：?

準備PCR反應所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應液配制表制備反應液。?

在反應器中加入反應液，?開始PCR反應。?

PCR反應的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進一步確認。?

轉染：?

準備轉染所需的載體DNA和細胞。?

制備轉染試劑，?將DNA載體溶解于轉染試劑中，?與細胞混合均勻。?

處理轉染細胞，?并進行下一步實驗。?

在操作過程中，?應注意實驗室安全規范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時登記購買耗材或試劑，?保持實驗環境的清潔和安全

下列是公司正在出售的產品：