注意事項：

1. 本試劑盒的檢測試劑中含有螢光素酶，反復凍融會導致其逐漸失活。盡管經測試本試劑反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，為取得良好的使用效果，*次解凍后可適當分裝保存。反復凍融過程中，可能會導致檢測試劑中出現少量沉淀，此時宜平衡至室溫，并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物，可以離心去除后使用，經測試不會影響后續的檢測效果。

2. 檢測時需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相鄰孔之間會產生相互干擾。

3. oechst 33258染色液(即用型)細胞組織染色使用說明中提供了檢測ATP標準品的方法，實際檢測細胞活力時通常并不需要檢測ATP標準品。

在凋亡細胞中，細胞膜對Hoechst 33258 的攝取增高，并且由于染色體高度濃縮，Hoechst 33258 與之結合增強，染色呈強藍色熒光，而正常細胞只呈微弱熒光，死細胞則不被染色，由此可檢測出凋亡。

操作方法(以下操作針對細胞爬片進行)????????????????????

1. 培養細胞并爬片；

2. 用冷PBS 洗滌細胞二次（貼壁細胞原位固定染色）

3. 加入500μL 的4%溶液(用戶自備)，4℃固定細胞10-30min；

4. 洗去固定液，用PBS 洗兩遍；

5. 滴加100μL Hoechst 33258 染色液，室溫染色10 min，水沖凈晾干；

6. 滴加一滴防淬滅封片液覆蓋樣本；

7. 以紫外光340nm 波長激發，發射波長為460nm，可以在熒光顯微鏡下觀察。

儲存：4℃，避光，有效期6個月。

細胞凋亡時產生顯著的變化是染色體固縮，DNA 裂解使細胞核形態產發生變化。熒光染料Hoechst33258 是一種無毒、水溶性雙苯咪唑類化合物，可作為熒光探針與DNA 分子結合。

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細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調控；

⑤細胞分化及其調控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

細胞生物學研究的常用技術有哪些：

1.顯微技術：包括顯微觀察,顯微操作.

2細胞組分分析技術：離心分離技術,生物大分子定位技術,定量細胞化學分析技術.
3.細胞工程：細胞培養。