注意事項：

1. 本試劑盒的檢測試劑中含有螢光素酶，反復凍融會導致其逐漸失活。盡管經測試本試劑反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，為取得良好的使用效果，*次解凍后可適當分裝保存。反復凍融過程中，可能會導致檢測試劑中出現少量沉淀，此時宜平衡至室溫，并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物，可以離心去除后使用，經測試不會影響后續的檢測效果。

2. 檢測時需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相鄰孔之間會產生相互干擾。

3. Western一抗二抗清除劑(中性)免疫檢測使用說明中提供了檢測ATP標準品的方法，實際檢測細胞活力時通常并不需要檢測ATP標準品。

使用Western一抗二抗去除液多次重復使用同一張膜，會導致蛋白信號的減弱。但是，本Western一抗二抗去除液，經過多個抗體的檢測試驗，通常可以重復利用膜3-5次。使用本試劑只需大約20-30分鐘即可實現蛋白膜的重復使用，然后可以進行封閉等后續的Western操作。

不同的Western一抗二抗去除液主要在去除結合的一抗二抗的原理方面略有不同。分別依靠去垢劑、酸性、堿性、還原劑、螯合劑、鹽濃度以及一些特殊試劑等的不同組合來解除一抗二抗的結合，同時又不會導致轉移到膜上的蛋白的損失。

用于普通的Western檢測時蛋白膜上一抗二抗的去除可以任選一種去除液。如果是NC膜，即硝酸纖維素膜時，不宜選用YT071N。從時間角度考慮，強堿性、弱堿性和中性的去除液所需的時間都比較短，可以優先考慮。從價格因素考慮，強堿性的去除液性價比高。從安全性考慮，中性的去除液由于沒有腐蝕性而表現出更高的安全性。弱堿性和弱酸性一抗二抗去除液的安全性次之。但只要正確操作，并進行適當防護，使用強堿性的一抗二抗去除液也是可行的。

　　對于特定的抗原和抗體，很難說哪一種Western一抗二抗去除液的效果好。在遇到一抗二抗去除效果欠佳時，可以考慮適當延長一抗二抗去除液的孵育時間，同時確保孵育時的溫度不低于20℃。溫度過低時一抗二抗的去除效果會下降。同時也可以考慮嘗試其它的一抗二抗去除液，以摸索出佳的適合您實驗條件的Western一抗二抗去除液。

注意事項：

1. 使用辣根過氧化物酶(HRP)，任何一次封閉(blocking)都應當使用5%脫脂牛奶，如果使用堿性磷酸酯酶，任何一次封閉都應當使用酪蛋白(casein)。

2. 本Western一抗二抗去除液僅適用于PVDF膜。用于硝酸纖維素膜時會導致轉移到膜上的蛋白有非常顯著的損失。

3. 使用化學發光試劑進行的Western檢測適用本試劑。使用非化學發光試劑進行的Western檢測，例如DAB，NBT/BCIP，不適用于本試劑。

儲存條件：-20℃，有效期一年。

本品用于Western中轉移了蛋白的膜的重復利用。在Western中完成了一抗二抗結合和后續的化學發光檢測后，有時還需要檢測tubulin、actin等表達量相對穩定的蛋白作為參照，或檢測其它蛋白進行比較。通過使用一抗二抗去除液，充分去除一抗二抗，可以非常方便地重新利用使用過的膜檢測其它蛋白。和重新跑一個SDS-PAGE膠相比，不僅省時省力，而且可以消除重新上樣而帶來的誤差，使可比性更強。

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細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調控；

⑤細胞分化及其調控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

細胞生物學研究的常用技術有哪些：

1.顯微技術：包括顯微觀察,顯微操作.

2細胞組分分析技術：離心分離技術,生物大分子定位技術,定量細胞化學分析技術.
3.細胞工程：細胞培養。