過氧亞硝基陰離子(ONOO-)檢測試劑盒

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過氧亞硝基陰離子(ONOO-)檢測試劑盒是一種利用熒光探針O31進行過氧亞硝基陰離子檢測的試劑盒。O31探針本身沒有熒光，可以自由穿過細胞膜，進入細胞內后，在過氧亞硝基陰離子存在的條件下，O31探針被氧化生成熒光物質O31F，O31F的綠色熒光強度與細胞內過氧亞硝基陰離子水平成正比，檢測O31F綠色熒光就可以知道細胞內過氧亞硝基陰離子的水平。

在激發波長488 nm，發射波長516 nm附近，使用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、熒光分光光度計、熒光酶標儀、流式細胞儀等檢測O31F熒光，從而測定細胞內過氧亞硝基陰離子水平。

O31熒光探針對過氧亞硝基陰離子(ONOO-)有較高的選擇性，但是也會與活性羥基反應。

本試劑盒可以用于各種真核培養細胞的檢測。我公司可以提供針對各種類型活性氧、活性氮的檢測試劑盒。

儲存條件：-20℃避光保存。

有效期：六個月。

步驟和注意事項：?

準備實驗環境：?確保實驗區域清潔，?使用酒精清潔計數板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細胞培養：?

準備試管或培養皿、?細胞培養基和待培養的細胞。?

取出保存于低溫下的細胞苗，?并加入培養基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細胞培養基和細胞種植在試管或培養皿中。?

將試管或培養皿放置于恒溫培養箱中，?定期更換培養液。?

細胞凍存與復蘇：?

細胞系的凍存是將生長較好的傳代細胞懸浮在加有冷凍保護劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?

復蘇則是將凍存的細胞系恢復到常溫的過程，?原則是“慢凍快融"，?以較大限度地保存細胞活力。?

細胞計數：?

制備細胞懸液，?使用消化單層培養細胞或收集懸浮培養細胞，?制成單個細胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計數板四角大方格中的細胞數，?細胞壓中線時，?只計左側和上方者，?不計右側和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對細胞進行染色，?并觀察細胞所發出的熒光信號，?以研究細胞結構和功能。?

聚合酶鏈反應（?PCR）?：?

準備PCR反應所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應液配制表制備反應液。?

在反應器中加入反應液，?開始PCR反應。?

PCR反應的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進一步確認。?

轉染：?

準備轉染所需的載體DNA和細胞。?

制備轉染試劑，?將DNA載體溶解于轉染試劑中，?與細胞混合均勻。?

處理轉染細胞，?并進行下一步實驗。?

在操作過程中，?應注意實驗室安全規范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時登記購買耗材或試劑，?保持實驗環境的清潔和安全

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