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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>生化測(cè)試劑盒>> 活性氧(ROS)檢測(cè)試劑盒-DCFHDA
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更新時(shí)間:2024-08-30 17:16:00瀏覽次數(shù):555次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 環(huán)保在線貨號(hào) | CS-C7946 | 貨期 | 1~3天 |
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規(guī)格 | 200T | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
商品介紹:
DCFH-DA本身沒有熒光,可以自由穿過細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)后,可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH 不能通透細(xì)胞膜,從而使探針很容易被標(biāo)記到細(xì)胞內(nèi)。在活性氧存在的條件下,DCFH被氧化生成熒光物質(zhì)DCF,綠色熒光強(qiáng)度與細(xì)胞內(nèi)活性氧水平成正比,檢測(cè)DCF 的熒光就可以知道細(xì)胞內(nèi)活性氧的水平。
在激發(fā)波長(zhǎng)502 nm,發(fā)射波長(zhǎng)530 nm 附近,使用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、熒光分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀、流式細(xì)胞儀等檢測(cè)DCF熒光,從而測(cè)定細(xì)胞內(nèi)活性氧水平。
本試劑盒可以用于各種真核培養(yǎng)細(xì)胞的檢測(cè)。本試劑盒提供了活性氧陽(yáng)性對(duì)照試劑,以便于活性氧的檢測(cè)。
儲(chǔ)存條件:-20℃保存。
有效期:一年。
商品屬性:
貨號(hào) | 規(guī)格 | 貨期 | 英文名稱 |
CS-C7946 | 200T | 1~3天 |
步驟和注意事項(xiàng):?
準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)環(huán)境:?確保實(shí)驗(yàn)區(qū)域清潔,?使用酒精清潔計(jì)數(shù)板和蓋玻片,?然后用吸水紙輕輕擦干。?
細(xì)胞培養(yǎng):?
準(zhǔn)備試管或培養(yǎng)皿、?細(xì)胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細(xì)胞。?
取出保存于低溫下的細(xì)胞苗,?并加入培養(yǎng)基中,?搖晃混合均勻。?
用移液管將細(xì)胞培養(yǎng)基和細(xì)胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?
將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中,?定期更換培養(yǎng)液。?
細(xì)胞凍存與復(fù)蘇:?
細(xì)胞系的凍存是將生長(zhǎng)較好的傳代細(xì)胞懸浮在加有冷凍保護(hù)劑的溶液中,?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度,?并在此溫度下對(duì)其長(zhǎng)期保存的過程。?
復(fù)蘇則是將凍存的細(xì)胞系恢復(fù)到常溫的過程,?原則是“慢凍快融",?以較大限度地保存細(xì)胞活力。?
細(xì)胞計(jì)數(shù):?
制備細(xì)胞懸液,?使用消化單層培養(yǎng)細(xì)胞或收集懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,?制成單個(gè)細(xì)胞懸液。?
在顯微鏡下,?用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格中的細(xì)胞數(shù),?細(xì)胞壓中線時(shí),?只計(jì)左側(cè)和上方者,?不計(jì)右側(cè)和下方者。?
熒光顯微鏡使用:?
使用熒光染料對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色,?并觀察細(xì)胞所發(fā)出的熒光信號(hào),?以研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。?
聚合酶鏈反應(yīng)(?PCR)?:?
準(zhǔn)備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?
按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?
在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液,?開始PCR反應(yīng)。?
PCR反應(yīng)的成功與否,?可以通過電泳、?測(cè)序等方法進(jìn)一步確認(rèn)。?
轉(zhuǎn)染:?
準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細(xì)胞。?
制備轉(zhuǎn)染試劑,?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中,?與細(xì)胞混合均勻。?
處理轉(zhuǎn)染細(xì)胞,?并進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。?
在操作過程中,?應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范,?避免隨意丟棄垃圾,?及時(shí)登記購(gòu)買耗材或試劑,?保持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的清潔和安全
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