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| 規格 | 5×105Cells/T25培養瓶 | 組織來源 | 肝臟組織 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | CS-X2864 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
產品信息：
貨號 | CS-X2864 | 組織來源 | 肝臟組織 |
傳代特性 | 可傳3代左右 | 培養基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
培養條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5% | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
商品介紹：
產品名稱：人肝星狀細胞 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 人肝星形細胞分離自肝臟組織；肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用；肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里最大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態結構：肝臟位于右上腹，隱藏在右側膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復蓋，僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝星形細胞（HSC）又名肝貯脂細胞、貯存細胞、竇周細胞、Ito細胞等，是肝臟細胞外基質的主要來源。HSC在激活后可進一步轉化為肌成纖維細胞樣細胞，各種可導致肝纖維化的因素均將HSC作為最終靶細胞。正常情況下，HSC處于靜止狀態，當肝臟發生炎癥反應或受到機械刺激等損傷時，HSC的表型由靜止型轉變為激活型，激活的HSC可通過增生和分泌細胞外基質參與肝纖維化的形成及肝內結構的重建，此過程也是肝纖維化的中心環節。肝星形細胞分布于肝臟的Disse間隙內，是合成、分泌細胞外基質的主要來源，在肝纖維化的發生中處于最重要地位。肝星形細胞是肝臟的間充質細胞，約占肝臟細胞總數的8%-13%。作為肝臟合成細胞外基質的主要細胞群，肝星形細胞不僅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等細胞外基質成分，合成一定量的膠原酶以維持正常的基底膜結構，還能通過其突起的收縮參與肝竇的微循環調節。此外，肝星形細胞能通過合成肝細胞生長因子、胰島素樣生長因子、表皮生長因子等促進肝細胞增殖和肝再生。 5.方法簡介： 公司實驗室分離的人肝星形細胞采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 公司實驗室分離的人肝星狀細胞經α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 成纖維細胞樣 傳代特性 可傳3代左右 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% |
細胞保存方法：
（一）細胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養液；
2. 取對數生長期的細胞，去除舊培養液，用PBS清洗。
3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養皿表面）把單層生長的細胞消化下來；
4. 離心1000rpm，5min；
5. 去除，加入適量配制好的凍存培養液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數，調節凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；
6. 將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；
7. 在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者；
8. 凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/ min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內。
注意事項：
1）、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態，約為80～90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質，應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產生。
2）、細胞在液氮中可長期凍存無，而不會影響細胞活力;在-70度可保存數月。
3）、注意冷凍保護劑之品質。DMSO應為試劑級等級，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用，因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲，可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化，可換用10%甘油凍存。
公司正在出售的產品：
小鼠腎動脈平滑肌細胞 | 人賴氨suan特異性脫甲基mei5A(JARID1A)檢測試劑盒 |
293H (人胚腎細胞) | 人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)試劑盒elisa |
4T1 (小鼠乳腺癌細胞) | 人抗內因子抗體(IgG)檢測試劑盒 |
A2058 (人皮膚癌細胞) | 雞轉化生長因子β2(TGF-β2)試劑盒ELISA |
AAV-293 (人胚腎細胞) | 哈扎拉病毒RT-PCR試劑盒 |
AN3 CA (人子宮內膜腺癌細胞) | 沙眼衣原體PCR試劑盒 |
B16-F10 (小鼠皮膚黑色素瘤細胞) | 河流弧菌PCR檢測試劑盒 |
Bcap-37 (人乳腺癌細胞) | 黑色普雷沃菌PCR檢測試劑盒 |
BGC-823 (人胃腺癌細胞(低分化)) | 雞血藤探針法PCR鑒定試劑盒 |
BT-474 [BT474] (人乳腺導管癌細胞) | 肉毒梭狀芽孢桿菌G型外毒su基因PCR試劑盒 |
C6 (大鼠膠質瘤細胞) | 嗜熱鏈球菌PCR檢測試劑盒 |
CCD-18Co (人結腸組織細胞) | 擠奶工結節病毒PCR檢測試劑盒 |
Caki-2 (人乳頭狀腎細胞癌細胞) | 人肝星狀細胞雞源性成分PCR試劑盒 |
CNE (人鼻咽癌細胞) | 嗜肺軍團菌PCR檢測試劑盒 |
CRT (人神經膠質瘤細胞) | 小腸結腸炎耶爾森菌PCR檢測試劑盒 |
操作步驟：
1）、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養基，使細胞處于指數生長期。
2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。
3）、離心收集培養之細胞，用加血清的培養基重懸起細胞，取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數細胞濃度及凍前存活率。
4）、取與細胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細胞懸液，并晃動試管，制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后，注明細胞名稱、代數、日期。然后進行凍存。
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